标准曲线的作法1、标准液浓度的选择:标准液浓度选一般应能包括待测样品可能变异最低与最高值。5种浓度,成倍增加或等级增加。2、标准液测定:重复测定2-3次,求其平均值,减少误差
1、标准液浓度的选择:标准液浓度选择一般应能包 括待测样品可能变异最低与最高值。5种浓度,成 倍增加或等级增加。 2、标准液测定:重复测定2-3次,求其平均值,减 少误差 标准曲线的作法
标准曲线法仪器:2max:根据Lambert-Beer定律,日期:室温:A与C成正比0.5y=0.912xR2=0.88360.40.3配制一系列标准液"Ax0.2C1、C2、C3、C4、C5、在10.1-入max下,测相应的A1、A2-A3、A4、A5.Cx0.30.20.40.500.10.6C(mg/ml)
标准曲线法 根据Lambert-Beer定律, A与C成正比 配制一系列标准液 C1、C2、C3、 C4、C5、在 lmax下,测相应的A1、A2、 A3、 A4、 A5。 y = 0.912x R 2 = 0.8836 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 C(mg/ml) A 仪器: lmax: 日期: 室温: AX CX
光密度-浓度标准曲线图的绘制1.电脑作图。横轴为C,纵轴为OD值。2.通过原点,尽可能使直线通过更多点,不在直线上的点尽量均匀地分布在直线两边3.坐标纸上注明实验项自名称,仪器型号,波长,日期,室温等
1.电脑作图。横轴为C,纵轴为OD值。 2.通过原点,尽可能使直线通过更多点,不在直线 上的点尽量均匀地分布在直线两边。 3.坐标纸上注明实验项目名称,仪器型号,波长, 日期,室温等。 光密度-浓度标准曲线图的绘制
利用标准管法计算待测溶液的浓度根据Lambert-beer定律:标准管:As=KLCs(下标S:标准液)待测管:Ax=KLCx(下标X:待测液)As/Ax=Cs/Cx即。L相等,温度相同,测定同一物质,所用单色光相同,则K相同,则:Cx=Ax/As·Cs·在实际操作中,常使待测管体积与标准管体积相等(以X代表测定管含量,S代表标准管含量)则:X=Ax/As·S·计算待测溶液浓度时,可根据测定时实际吸取的标准液的体积(Vs)和待测样品的体积(Vx),将上式演变为:待测溶液浓度A.C.ISC-XVxAs
• 根据Lambert-beer定律: 标准管:As=KLCs (下标S:标准液) 待测管:Ax=KLCx (下标X:待测液) • L相等,温度相同,测定同一物质,所用单色光相同,则K相同,则: As/Ax=Cs/Cx即 Cx=Ax/As·Cs • 在实际操作中,常使待测管体积与标准管体积相等(以X代表测定管含量,S代表标准管含量) 则: X=Ax/As·S • 计算待测溶液浓度时,可根据测定时实际吸取的标准液的体积(Vs)和待测样品的体积(Vx),将 上式演变为:待测溶液浓度 利用标准管法计算待测溶液的浓度 Vx Vs Cs As Ax C • • x =
·蛋白质定量分析即蛋白质溶液的浓度测定;?现实应用:1.临床检测一一血清蛋白浓度测定;2.科学研究一一纯化蛋白的浓度测定
• 蛋白质定量分析即蛋白质溶液的浓度测定; • 现实应用: 1. 临床检测——血清蛋白浓度测定; 2. 科学研究——纯化蛋白的浓度测定;