(三)石蜡油低温保藏法 具体操作是菌种为斜面培养菌种,斜 面不宜过長:选择纯净优质石蜡油,置 角烧瓶中经过121℃高压蒸汽灭菌1 2h,将其放烘箱中(60℃左右)干热处理, 去除灭菌时渗入的水分 石蜡油变得 清澈透明后冷却即可加入斜面,斜面上 不能出现气泡,液蜡添加量以高出斜面 顶部约1cm左右为宜
(三)石蜡油低温保藏法 • 具体操作是：菌种为斜面培养菌种，斜 面不宜过长；选择纯净优质石蜡油，置 三角烧瓶中经过121℃高压蒸汽灭菌1～ 2h，将其放烘箱中(160℃左右)干热处理， 去除灭菌时渗入的水分，待石蜡油变得 清澈透明后冷却即可加入斜面，斜面上 不能出现气泡，液蜡添加量以高出斜面 顶部约1cm左右为宜
(四)干燥保藏 微生物生长雷要水分,于燥法是使菌处于 干燥条件下停止生长及处于休眠状态,达 到较长期保藏的目的。此法用于细菌芽孢 或产分生孢子的菌种,是现在发酵工业生 中较常用的菌种保藏方法。为了转接方 便,控制接种量以及对菌种的保护作用 通常将南种的分生孢子、芽疱,甚至菌丝 体吸附于一些载体表面放至干燥容器里进 行常压干燥或真空主燥,所用载体有沙土 滤纸、硅胶及大(小米等
(四)干燥保藏 • 微生物生长需要水分，干燥法是使菌处于 干燥条件下停止生长及处于休眠状态，达 到较长期保藏的目的。此法用于细菌芽孢 或产分生孢子的菌种，是现在发酵工业生 产中较常用的菌种保藏方法。为了转接方 便，控制接种量以及对菌种的保护作用， 通常将菌种的分生孢子、芽孢，甚至菌丝 体吸附于一些载体表面放至干燥容器里进 行常压干燥或真空干燥，所用载体有沙土、 滤纸、硅胶及大(小)米等
沙士管法 取河(海沙,过0.78m(24目)筛,用10%盐酸 浸泡2h,倒去盐酸用清水冲洗至p是中性,去水 烘干或晒干。取菜园或果园土粉碎过筛,把烘干 的沙土按3:2或1:1混合装入指形管或高100m, 直径为10m小试管中,高约lcm(约2g),塞棉塞 21℃灭菌1h,电可用170℃2h干热灭菌(或蒸汽 次间歇灭菌),蒸汽灭菌后需烘干。经肉汤检查确 突证明无菌即可使用。将要保存的斜面菌种制成 浓孢子悬液(10/m1),用灭菌滴管或吸管吸取孢 子悬液滴入无菌沙生生,每管约030.5m,用 接种环将其混合均匀
1.沙土管法 取河(海)沙，过0.78mm(24目)筛，用10％盐酸 浸泡24h，倒去盐酸用清水冲洗至pH呈中性，去水 烘干或晒干。取菜园或果园土粉碎过筛，把烘干 的沙土按3：2或1：1混合装入指形管或高100mm， 直径为10mm的小试管中，高约1cm(约2g)，塞棉塞 121℃灭菌1h，也可用170℃2h干热灭菌(或蒸汽三 次间歇灭菌)，蒸汽灭菌后需烘干。经肉汤检查确 实证明无菌即可使用。将要保存的斜面菌种制成 浓孢子悬液(≥106/ml)，用灭菌滴管或吸管吸取孢 子悬液滴入无菌沙土上，每管约0.3～0.5ml，用 接种环将其混合均匀
沙士管法 也可将真菌分生孢子用接种环从斜面直 接挑取放入沙主中。然后将沙土管抽真 干燥。这时管内砂土松散,表明已干 燥。将干燥的砂生管放置在干燥器或密 闭容器内、干燥器下部放置变色硅胶等 干燥剂,于4℃下保存。从斜面取出的孢 子放入沙士管中混匀后,可以不抽真空 直接放千燥器内保存
1.沙土管法 • 也可将真菌分生孢子用接种环从斜面直 接挑取放入沙土中。然后将沙土管抽真 空干燥。这时管内砂土松散，表明已干 燥。将干燥的砂土管放置在干燥器或密 闭容器内、干燥器下部放置变色硅胶等 干燥剂，于4℃下保存。从斜面取出的孢 子放入沙土管中混匀后，可以不抽真空 直接放干燥器内保存
沙士管法 在沙土保藏初期,菌死亡率高,以后逐 渐减慢,存活下来的孢子在以后保存期 间稳定性较好,保藏的有效时间与菌种 活率的关系见图2-10 用 土管保藏的某些抗生素产生菌保藏期可 达18年(霉素和链霉素产生菌)到22年 (新霉素产生菌),但对利福霉素、卡那 霉素、四环素等容易产生变异的菌种 就不适合作长期的沙生管保存
1.沙土管法 • 在沙土保藏初期，菌死亡率高，以后逐 渐减慢，存活下来的孢子在以后保存期 间稳定性较好，保藏的有效时间与菌种 存活率的关系见图2-10。 用沙 土管保藏的某些抗生素产生菌保藏期可 达18年(土霉素和链霉素产生菌)到22年 (新霉素产生菌)，但对利福霉素、卡那 霉素、四环素等容易产生变异的菌种， 就不适合作长期的沙土管保存