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实验3 以均聚物为模板指导多肽的合成。在含有tRNA、核糖体、 AA-tRNA合成酶及其它蛋白质因子的细胞抽提物中加入 mRNA或人工合成的均聚物作为模板以及ATP、GTP、氨基 酸等成分时又能合成新的肽链,新生肽链的氨基酸顺序由外 加的模板来决定。 1961年, Nirenberg等以poy(U)作模板时发现合成了多 聚苯丙氨酸,从而推出UUU代表苯丙氨酸(Phe)。以poy (C)及poy(A)做模板分别得到多聚脯氨酸和多聚赖氨酸 实验4 以特定序列的共聚物为模板指导多肽的合成。以多聚二核 苷酸作模板可合成由2个氨基酸组成的多肽, 5.. UGU GUG UGU GUG UGU GUG..3’,不管读码从U开 始还是从G开始,都只能有UGU(Cys)及GUG(Val)两 种密码子
▪ 实验3: 以均聚物为模板指导多肽的合成。 在含有tRNA、核糖体、 AA-tRNA合成酶及其它蛋白质因子的细胞抽提物中加入 mRNA或人工合成的均聚物作为模板以及ATP、GTP、氨基 酸等成分时又能合成新的肽链，新生肽链的氨基酸顺序由外 加的模板来决定。 1961年，Nirenberg等以poly（U）作模板时发现合成了多 聚苯丙氨酸，从而推出UUU代表苯丙氨酸（Phe）。以poly （C）及poly（A）做模板分别得到多聚脯氨酸和多聚赖氨酸。 ▪ 实验4: 以特定序列的共聚物为模板指导多肽的合成。以多聚二核 苷酸作模板可合成由2个氨基酸组成的多肽， 5'…UGU GUG UGU GUG UGU GUG…3',不管读码从U开 始还是从G开始，都只能有UGU（Cys）及GUG（Val）两 种密码子
实验5: 三核苷酸 3种氨基 成的多肽。如以多聚(UUC)为模板,可能有3种 起读方式: 5 UUCUUCUUCUUCUUC..3或5’.UCU UCU UCU UCU UCU.3'Ei 5. CUU CUU CUU CUUCUU.3分别产生UUC(Phe)、UCU(Ser) 或CUU(Leu) 多聚三核苷酸为模板时也可能只合成2种多肽: 5'.. GUAGUAGUA GUA GUA.3E5.UAG UAG UAGUAG UAG.3 或5. AGUAGU AGU AGU AGU.3由第二种读码 方式产生的密码子UAG是终止密码,不编码任何氨 基酸,因此,只产生GUA(Va)或AGU(Ser)
▪ 实验5: 以共聚三核苷酸作为模板可得到有3种氨基酸组 成的多肽。如以多聚（UUC）为模板，可能有3种 起读方式： 5’…UUC UUC UUC UUC UUC…3’或 5’…UCU UCU UCU UCU UCU…3’或 5'…CUU CUU CUU CUU CUU…3'分别产生UUC（Phe）、UCU（Ser） 或CUU（Leu）. 多聚三核苷酸为模板时也可能只合成2种多肽： 5’…GUA GUA GUA GUA GUA…3’或5’…UAG UAG UAG UAG UAG…3’ 或5’…AGU AGU AGU AGU AGU…3’由第二种读码 方式产生的密码子UAG是终止密码，不编码任何氨 基酸，因此，只产生GUA（Val）或AGU（Ser）
实验6: 以随机多聚物指导多肽合成。 Nirenberg等 及 Ochoa等又用各种随机的多聚物作模板合 成多肽。例如,以只含A、C的多聚核苷酸作 模板,任意排列时可出现8种三联子,即 CCC、CCA、CAC、ACC、CAA、ACA、 AAC、AAA,获得由Asn、His、Pro、Gln、 Thr、Lys等6种氨基酸组成的多肽
▪ 实验6: 以随机多聚物指导多肽合成。Nirenberg等 及Ochoa等又用各种随机的多聚物作模板合 成多肽。例如，以只含A、C的多聚核苷酸作 模板，任意排列时可出现8种三联子，即 CCC、CCA、CAC、ACC、CAA、ACA、 AAC、AAA，获得由Asn、His、Pro、Gln、 Thr、Lys等6种氨基酸组成的多肽
(3)氨基酸的“活化”与核糖体结合技术 如果把氨基酸与ATP和肝脏细胞质共培养,氨 基酸就会被固定在某些热稳定且可溶性RNA分子 transfer rna, tRNA) 现将氨基酸活化后的 产物称为氨基酰RNA( aminoacyl-RNA),并把 催化该过程的酶称为氨基酰合成酶( amInoacy tRNA Synthetase 以人工合成的三核苷酸如UUU、UCU、UGU 等为模板,在含核糖体、AA-tRNA的反应液中保温 后通过硝酸纤维素滤膜,只有游离的AA-tRNA因相 对分子质量小而通过滤膜,而核糖体或与核糖体结 合的 AA-tRNA则留在滤膜上,这样可把己结合与耒 结合的AA-tRNA分开
▪ （3）氨基酸的“活化”与核糖体结合技术。 如果把氨基酸与ATP和肝脏细胞质共培养，氨 基酸就会被固定在某些热稳定且可溶性RNA分子 （transfer RNA，tRNA）上。现将氨基酸活化后的 产物称为氨基酰-tRNA（aminoacyl-tRNA），并把 催化该过程的酶称为氨基酰合成酶（aminoacyltRNA Synthetase）。 以人工合成的三核苷酸如UUU、UCU、UGU 等为模板，在含核糖体、AA-tRNA的反应液中保温 后通过硝酸纤维素滤膜，只有游离的AA-tRNA因相 对分子质量小而通过滤膜，而核糖体或与核糖体结 合的AA-tRNA则留在滤膜上，这样可把已结合与未 结合的AA-tRNA分开