细胞特异性糖基化途径—淋巴细胞中进行,它不依赖于 内质网和高尔基体。 IgG的糖基化,等分 GIcNAc残基连接在核心甘露糖上,该 糖基化在抗体依赖性细胞介导的细胞毒性中起重要作用。 IgG蛋白的铰链区,富含Ser、Thr和Pro,5个Ser全部糖 基化。 促黄体激素、促甲状腺素等的硫酸化只能在垂体中发生
细胞特异性糖基化途径——淋巴细胞中进行，它不依赖于 内质网和高尔基体。 IgG的糖基化，等分GlcNAc残基连接在核心甘露糖上，该 糖基化在抗体依赖性细胞介导的细胞毒性中起重要作用。 IgG蛋白的铰链区，富含Ser、Thr和Pro，5个Ser全部糖 基化。 促黄体激素、促甲状腺素等的硫酸化只能在垂体中发生
尽管哺乳动物细胞具有细胞内的糖基化装置,但不同细胞 系,糖基化特征不同 鼠和猪细胞倾向于添加乙酰果糖而不是乙酰唾液酸,在鼠 杂交瘤或人鼠杂交瘤生产的抗体中,乙酰果糖占优势。 CHO细胞不能合成等分N-乙酰葡萄糖胺,而鼠细胞系却 能形成半乳糖末端,对人有免疫原性 要根据糖基化的结构,选择适宜的细胞系
尽管哺乳动物细胞具有细胞内的糖基化装置，但不同细胞 系，糖基化特征不同。 鼠和猪细胞倾向于添加乙酰果糖而不是乙酰唾液酸，在鼠 杂交瘤或人鼠杂交瘤生产的抗体中，乙酰果糖占优势。 CHO细胞不能合成等分N-乙酰葡萄糖胺，而鼠细胞系却 能形成半乳糖末端，对人有免疫原性。 要根据糖基化的结构，选择适宜的细胞系
细胞系 Fu uc Gal 唾液酸 a1,6 13 2,2,糖基等分 F GaINAc Gal 3 GluNAc BHK + CHO 十 0 0_0-0 鼠杂交瘤 6000+++++ 0000 C127 +十 +十 J558L +十 +++0 人淋巴细胞++ 0 0 人垂体 0000000 H十 0 Namalwa 人鼠杂交瘤++ 0
细胞系 Fuc Gal 唾液酸 α1,6 α1,3 Fuc α1,3 Gal SO4 - GalNAc α2, 3 α2, 6 糖 基 化 等 分 GluNAc BHK ++ 0 + 0 ++ 0 - 0 CHO ++ - 0 0 ++ 0 + 0 鼠杂交瘤 ++ 0 ++ 0 ++ 0 +++ 0 C127 ++ 0 ++ ++ ++ + + +++ 0 J558L ++ 0 ++ - ++ + + +++ 0 人淋巴细胞 ++ 0 0 0 + + 0 ++ 人垂体 ++ 0 0 +++ + + 0 ++ Namalwa ++ 0 0 0 ++ + + - - 人鼠杂交瘤 ++ 0 0 0 + + + 0
2.哺乳动物细胞表达系统 基因工程哺乳动物细胞系:失去分化能力的无限生长细胞 系,即永久性细胞。表达的蛋白质能正确加工、修饰并折 叠形成具有生物活性的功能分子,接近或类似天然产物。 糖基化等修饰是糖蛋白行使功能所必需的,而且对产品质 量有影响,如生物活性、稳定性、免疫原性等。原核细胞 表达的EPO无糖基化,在体内表现无活性。原核表达的 GM一CSF虽有活性,但在体内产生抗体。 动物细胞表达产物分泌到培养液,容易分离纯化。约有70 %批准的蛋白质药物由哺乳动物细胞系统表达制造,而且 数目还在不断增加
2. 哺乳动物细胞表达系统 基因工程哺乳动物细胞系：失去分化能力的无限生长细胞 系，即永久性细胞。表达的蛋白质能正确加工、修饰并折 叠形成具有生物活性的功能分子，接近或类似天然产物。 糖基化等修饰是糖蛋白行使功能所必需的，而且对产品质 量有影响，如生物活性、稳定性、免疫原性等。原核细胞 表达的EPO无糖基化，在体内表现无活性。原核表达的 GM－CSF虽有活性，但在体内产生抗体。 动物细胞表达产物分泌到培养液，容易分离纯化。约有70 ％批准的蛋白质药物由哺乳动物细胞系统表达制造，而且 数目还在不断增加
表达系统 O-糖基化氯聚甘露糖高甘露糖复合体 大肠杆菌 0 0 0 0 酿酒酵母 +++ 昆虫S9 十—+ ++++d 仓鼠CHO + ++ + 仓鼠BHK + + + 鼠杂交瘤 + ++ 鼠骨髓瘤 + + ++ C127 + J558L + 人淋巴细胞 + 0 0—0-0000000 + Namalwa ++ + 人鼠杂交瘤 +
表达系统 O-糖基化 寡聚甘露糖 高甘露糖 复合体 大肠杆菌 0 0 0 0 酿酒酵母 ＋＋ 0 ＋＋＋ ＋ － 昆虫Sf9 ＋＋ ＋＋＋＋ 0 － 仓鼠CHO ＋＋ ＋＋ 0 ＋＋ 仓鼠BHK ＋＋ ＋＋ 0 ＋＋ 鼠杂交瘤 ＋＋ ＋＋ 0 ＋＋ 鼠骨髓瘤 ＋＋ ＋＋ 0 ＋＋ C127 ＋＋ ＋＋ 0 ＋＋ J558L ＋＋ － 0 ＋＋ 人淋巴细胞 ＋＋ 0 0 ＋ Namalwa ＋＋ ＋＋ 0 ＋＋ 人鼠杂交瘤 － ＋＋ 0 ＋＋