不同的培养条件,葡萄糖和谷氨酰胺代谢重叠于丙酮酸 在正常细胞系中,丙酮酸羧化产生草酰乙酸,而草酰乙酸 来源于谷氨酰胺。 在连续细胞系中,没有这种流动。能量是以ATP和 NADPH的形式提供,来源于葡萄糖和谷氨酰氨,但二种 细胞系对各个代谢途径的贡献和所起的作用不同。 常流加葡萄糖或谷氨酰氨,控制整个代谢过程,避免有毒 废物积累
不同的培养条件，葡萄糖和谷氨酰胺代谢重叠于丙酮酸。 在正常细胞系中，丙酮酸羧化产生草酰乙酸，而草酰乙酸 来源于谷氨酰胺。 在连续细胞系中，没有这种流动。能量是以ATP和 NADPH的形式提供，来源于葡萄糖和谷氨酰氨，但二种 细胞系对各个代谢途径的贡献和所起的作用不同。 常流加葡萄糖或谷氨酰氨，控制整个代谢过程，避免有毒 废物积累
3.蛋白质糖基化 蛋白质合成是以mRNA为模板,在核糖体上完成。而蛋白 质的糖基化无需模板指导,因此糖蛋白的寡糖结构容易发 生变化。 糖蛋白的单糖单元:α-D-葡萄糖、α-D半乳糖、α-D-甘露 糖、α-D-木糖、α-D-岩藻糖、N-乙酰-α-D-葡萄糖胺、N 酰-(-D半乳糖胺和-N-乙酰神经氨酸(或唾液酸)。 糖基化类型:寡糖基以共价键与蛋白质的氮原子结合为N 糖基化,或与氧原子结合为O糖基化。这两种糖基化的 位点和数量及糖的种类都不同
3. 蛋白质糖基化 蛋白质合成是以mRNA为模板，在核糖体上完成。而蛋白 质的糖基化无需模板指导，因此糖蛋白的寡糖结构容易发 生变化。 糖蛋白的单糖单元:α-D-葡萄糖、α-D-半乳糖、α-D-甘露 糖、α-D-木糖、α-D-岩藻糖、N-乙酰-α-D-葡萄糖胺、N- 乙酰-α-D-半乳糖胺和α-N-乙酰神经氨酸（或唾液酸）。 糖基化类型：寡糖基以共价键与蛋白质的氮原子结合为N- 糖基化，或与氧原子结合为O-糖基化。这两种糖基化的 位点和数量及糖的种类都不同
N-糖基化:聚糖部分连接在天门冬酰胺的氨基上,其模体 的保守序列为Asn-X-Thr/ser(x为除脯氨酸以外的任意氨 基酸)。如果X为Trp、Asp、Glu和Leu,对糖基化有负影 响,而第三位Thr能增强糖基化。 N-糖基化分为高甘露糖型、复合型和杂合型三种类型,共 同核心是3个甘露糖和2个N-乙酰葡萄糖胺组成的5糖 (Man3 GluNAc2),其他糖形成支链。 高甘露糖型的支链为甘露聚糖(5~9聚体),无其他糖。 复合型含有2个以上支链,如乙酰半乳糖胺、果糖和唾液 酸等。 杂合型至少含有一条复合糖链,另一个链含有甘露糖
N-糖基化：聚糖部分连接在天门冬酰胺的氨基上，其模体 的保守序列为Asn-X-Thr/Ser (X为除脯氨酸以外的任意氨 基酸)。如果X为Trp、Asp、Glu和Leu，对糖基化有负影 响，而第三位Thr能增强糖基化。 N-糖基化分为高甘露糖型、复合型和杂合型三种类型，共 同核心是3个甘露糖和2个N-乙酰葡萄糖胺组成的5糖 （Man3GluNAc2），其他糖形成支链。 高甘露糖型的支链为甘露聚糖（5～9聚体），无其他糖。 复合型含有2个以上支链，如乙酰半乳糖胺、果糖和唾液 酸等。 杂合型至少含有一条复合糖链，另一个链含有甘露糖
O-聚糖连接在 Thr/Ser的羟基上,还没有发现保守序列。 O-聚糖有四种不同的核心结构,都含有N-乙酰半乳糖胺 基,糖基化会影响蛋白质的局部构象。 O-糖基化比较小,一般为1~6个寡聚糖,但比N-糖基化 变化更大。 O糖基化只在高尔基体上进行,糖基单元有木糖、葡萄 糖
O-聚糖连接在Thr/Ser的羟基上，还没有发现保守序列。 O-聚糖有四种不同的核心结构，都含有N-乙酰半乳糖胺 基，糖基化会影响蛋白质的局部构象。 O-糖基化比较小，一般为1～6个寡聚糖，但比N-糖基化 变化更大。 O-糖基化只在高尔基体上进行，糖基单元有木糖、葡萄 糖
糖基化磷脂酰肌醇锚着点:它在膜与蛋白质之间形成稳定 的相互作用,都具有相同的核心结构:胆胺-PO4Man GIchN2-肌醇PO4-脂。 胆胺形成膜内蛋白的桥,而肌醇在膜内 在细胞培养生产重组蛋白时,磷脂酶C可切割此类蛋白, 有利于纯化
糖基化磷脂酰肌醇锚着点：它在膜与蛋白质之间形成稳定 的相互作用，都具有相同的核心结构：胆胺-PO4 -Man2 - GlcHN2 -肌醇-PO4 -脂。 胆胺形成膜内蛋白的桥，而肌醇在膜内。 在细胞培养生产重组蛋白时，磷脂酶C可切割此类蛋白， 有利于纯化