临床组织样本western blotting2018
临床组织样本 western blotting 2018
临床组织样本处理对蛋白质进行定量Western Blotting
临床组织样本处理 对蛋白质进行定量 Western Blotting
临床组织样本处理1.临床组织样本包括心肝牌肺肾以及脑组织等，由于血液中成分比较复杂，为避免其对结果的影响，在收集样本时需要将组织中的血液尽量排尽；2.将组织至于研钵中，用剪刀将组织尽量剪碎，再放入适量的液氮，并迅速用钵杆研磨组织，用RIPA裂解液裂解组织。对于心肝脾肾等组织可每50~100mg加1mlRIPA裂解液，肺100~200mg加1mlRIPA裂解液。可用移液器反复吹打，或者将组织和裂解液的混合液放在振荡器上振荡以组织得到充分裂解。过程中须尽量保持低温，快速操作。3.裂解后，将裂解液移1.5ml离心管中，于4℃离心机中，12000rpm离心20min，取上清分装于0.5ml离心管中并置于-20℃保存（-80℃长期保存）
临床组织样本处理 1. 临床组织样本包括心肝脾肺肾以及脑组织等，由于血液中成分比较复杂，为 避免其对结果的影响，在收集样本时需要将组织中的血液尽量排尽； 2. 将组织至于研钵中，用剪刀将组织尽量剪碎，再放入适量的液氮，并迅速用 钵杵研磨组织，用RIPA裂解液裂解组织。对于心肝脾肾等组织可每50~100mg加 1ml RIPA裂解液，肺100~200mg加1ml RIPA裂解液。可用移液器反复吹打，或者 将组织和裂解液的混合液放在振荡器上振荡以组织得到充分裂解。过程中须尽量 保持低温，快速操作。 3. 裂解后，将裂解液移1.5ml 离心管中，于4℃离心机中，12000rpm离心20min， 取上清分装于0.5ml 离心管中并臵于-20 ℃保存（-80℃长期保存）
RIPA裂解液：可购买，也可自己配制配方：试剂浓度Tris碱50mmol/L,PH7.5氯化钠150mmol/LSDS0.1%EDTA1mmol/L1%NP-401%去氧胆酸钠(deoxycholate)RIPA裂解液（强）RIPA裂解液（中）RIPA裂解液（弱）1%TritonX-100,1%NP-40,1%NP-401%deoxycholate,0.5%deoxycholate0.25%deoxycholate0.1%SDS使用时还需要加入蛋白酶抑制剂等防止蛋白质降解
RIPA裂解液：可购买，也可自己配制 配方： 试剂 浓度 Tris碱 50mmol/L, PH7.5 氯化钠 150mmol/L SDS 0.1% EDTA 1mmol/L NP-40 1% 去氧胆酸钠(deoxycholate) 1% RIPA裂解液（强） RIPA裂解液（中） RIPA裂解液（弱） 1% Triton X-100, 1% deoxycholate, 0.1% SDS 1% NP-40, 0.5% deoxycholate 1% NP-40, 0.25% deoxycholate 使用时还需要加入蛋白酶抑制剂等防止蛋白质降解
对蛋白质进行定量BCA蛋白浓度测定试剂盒（增强型)一碧云天，货号为P0009产品名称包装产品编号P0009-1BCA试剂A500ml×2P0009-2BCA试剂B30ml30mg×2P0009-3蛋白标准（BSA）5mlP0009-4蛋白标准配制液
对蛋白质进行定量 BCA蛋白浓度测定试剂盒(增强型)—碧云天 ,货号 为P0009 产品编号 产品名称 包装 P0009-1 BCA试剂 A 500ml×2 P0009-2 BCA试剂 B 30ml P0009-3 蛋白标准(BSA) 30mg×2 P0009-4 蛋白标准配制液 5ml