第三节外源基因在真核细胞中的表达 酵母菌、植物原生质体、动物培养细胞等。 外源基因 真核或病毒启动子 MCS PolyA信号终止子
酵母菌、植物原生质体、动物培养细胞等。 真核或病毒启动子MCS PolyA信号 终止子 外源基因 第三节外源基因在真核细胞中的表达
真核生物表达的优越性和必要性 1、真核生物具有转录后加工系统,可识别并删 除基因中的内含子,剪切加工为成熟mRNA 2、具备完善的翻译后加工系统,可进行糖基化、 乙酰化等修饰,使蛋白形成正确的天然构型, 因而真核生物表达系统产生的蛋白更接近天 然状态,有利于其功能、生物活性的研究
一、真核生物表达的优越性和必要性 1、真核生物具有转录后加工系统，可识别并删 除基因中的内含子，剪切加工为成熟mRNA 2、具备完善的翻译后加工系统，可进行糖基化、 乙酰化等修饰，使蛋白形成正确的天然构型， 因而真核生物表达系统产生的蛋白更接近天 然状态，有利于其功能、生物活性的研究
真核生物表达的优越性和必要性 3、某些真核细胞可将基因表达产物分泌到 细胞培养液中,简化了纯化工艺,降低 了生产成本。 4、另外,真核生物表达的调控方式非常复杂, 有助于我们深入了解基因调控机制
3、某些真核细胞可将基因表达产物分泌到 细胞培养液中，简化了纯化工艺，降低 了生产成本。 4、另外，真核生物表达的调控方式非常复杂， 有助于我们深入了解基因调控机制。 一、真核生物表达的优越性和必要性
第三节外源基因在真核细胞中的表达 真核生物基因表达与调控的特点 1基因组DNA的存在形式可影响基因表达 2转录与翻译不偶联 3调控是多层次的 4具有组织和细胞类型特异性 5对信号分子反应不同
第三节外源基因在真核细胞中的表达 一、真核生物基因表达与调控的特点 1.基因组DNA的存在形式可影响基因表达 2.转录与翻译不偶联 3.调控是多层次的 4.具有组织和细胞类型特异性 5.对信号分子反应不同
第三节外源基因在真核细胞中的表达 二、真核生物基因表达载体的组成特征 1原核DNA序列 2启动子 组成型启动子、诱导型启动子、组织特异性启动子、 杂合启动子 3增强子 4终止子 5内含子 6 polyA加尾信号 7选择标记基因和报告基因
第三节外源基因在真核细胞中的表达 二、真核生物基因表达载体的组成特征 1.原核DNA序列 2.启动子 组成型启动子、诱导型启动子、组织特异性启动子、 杂合启动子 3.增强子 4.终止子 5.内含子 6.polyA加尾信号 7.选择标记基因和报告基因