实验一细胞形态大小观察 、实验目的 学习测微尺的使用,并测量洋葱内表皮细胞的大小 二、实验原理 使用镜台测微尺,目镜测微尺(直线式、网格式)和微调焦轮上的标尺测 量细胞的大小。 三、实验用品 2.5%番红溶液;洋葱上皮细胞;草履虫、洋葱根尖及其它细胞永久切片 四、实验步骤: 一)目微尺的校对:将目微尺放入目镜、台微尺卡在载物台上,调焦,看清台 微尺,台微尺和目微尺左、右各选一重合线。并根据下面公式计算 载玻片大小的台微尺→载物台 →台、目微尺在视野内平行 圆的目微尺→目镜筒(10×40×,100×) →台、目微尺各选一重合线,读取这一范围内的格数→目微尺每格大小→ X10、40.100=an 台微尺刻度数 目微尺刻度数 →移去台微 a::台微尺实际值(0.0lmm) 尺,换上洋葱内表皮标本 (二)观察细胞形态,测量细胞大小 1、观察洋葱表皮cel(取其内表皮放在载玻片上,加番红染5分钟封片观察) (1)测量细胞横截面面积 撕取洋葱内表皮0.3×0.3cm→放于载玻片→番红染液染色5min →加盖玻片(用滤纸条吸去多余的液体)→10×物镜下观察→粗调焦轮找到 细胞→微调焦轮调节清晰,看到细胞→旋转目镜将标尺与细胞长边平行,并 记录格数a→旋转目镜将标尺与细胞宽边平行,记录格数b→细胞截面面积 = axx bx(x实际数值前面己经校对)
1 实验一 细胞形态大小观察 一、 实验目的： 学习测微尺的使用，并测量洋葱内表皮细胞的大小。 二、 实验原理： 使用镜台测微尺 ，目镜测微尺（直线式、网格式）和微调焦轮上的标尺测 量细胞的大小。 三、实验用品： 2.5% 番红溶液；洋葱上皮细胞；草履虫、洋葱根尖及其它细胞永久切片。 四、实验步骤： （一）目微尺的校对：将目微尺放入目镜、台微尺卡在载物台上，调焦，看清台 微尺，台微尺和目微尺左、右各选一重合线。并根据下面公式计算： 载玻片大小的台微尺→ 载物台→ →台、目微尺在视野内平行 圆的目微尺→目镜筒(10×,40×,100×) →台、目微尺各选一重合线，读取这一范围内的格数→目微尺每格大小→ X10、 40、 100 = a a n ：台微尺刻度数 m ：目微尺刻度数 →移去台微 a ：:台微尺实际值（0.01mm） 尺，换上洋葱内表皮标本 （二）观察细胞形态，测量细胞大小： 1、观察洋葱表皮 cell（取其内表皮放在载玻片上，加番红染 5 分钟封片观察） （1）测量细胞横截面面积 撕取洋葱内表皮 0.3×0.3cm → 放于载玻片→ 番红染液染色 5min → 加盖玻片（用滤纸条吸去多余的液体）→ 10×物镜下观察→ 粗调焦轮找到 细胞→ 微调焦轮调节清晰，看到细胞 → 旋转目镜将标尺与细胞长边平行，并 记录格数 a → 旋转目镜将标尺与细胞宽边平行，记录格数 b → 细胞截面面积 =ax×bx（x 实际数值前面已经校对）
(2)测量细胞厚度: 调节微调焦轮→两细胞之间变成细,黄亮色线,细胞表面柱状杂质(上表 皮)→记录微调焦论刻度 调节微调焦轮→两细胞之间黄亮线逐渐变粗,变黑,变成黑色细线,细胞 表面杂质(下表皮)→记录微调焦轮刻度 两次记录之间焦轮刻度数c→细胞厚度=cx2um(微调焦轮刻度数2um/格) (3)测量细胞核体积 调节微调焦轮→细胞核清晰→调节目微尺测量细胞核→根据球的体积→计算 细胞核的体积n 2、计算细胞体积,求NP NP=vc21009%(NP—核质比) V长方=abcV椭形=4πab2/3(a→长半径b→短半径c→细胞高) V球=4πR3/3V柱形=πh(r→半径h→高) 3、其它细胞永久片的观察。 五、实验结果 1、求洋葱细胞的NP。 2、画出洋葱表皮细胞。 3、其它细胞永久片的细胞形态图。 2
2 （2）测量细胞厚度： 调节微调焦轮→ 两细胞之间变成细，黄亮色线，细胞表面柱状杂质（上表 皮）→ 记录微调焦论刻度 调节微调焦轮 → 两细胞之间黄亮线逐渐变粗，变黑，变成黑色细线，细胞 表面杂质（下表皮）→ 记录微调焦轮刻度 → 两次记录之间焦轮刻度数 c → 细胞厚度=c×2μm（微调焦轮刻度数 2μm/格） （3）测量细胞核体积 调节微调焦轮→ 细胞核清晰→ 调节目微尺测量细胞核→ 根据球的体积→计算 细胞核的体积 Vn 2、计算细胞体积，求 NP NP= ×100% (NP——核质比) V 长方体=a·b·c V 椭圆形= 4πab2 /3 (a→长半径 b→短半径 c→细胞高) V 球=4πR3 /3 V 圆柱形=πr2h (r→半径 h→高) 3、其它细胞永久片的观察。 五、实验结果： 1、求洋葱细胞的 NP。 2、画出洋葱表皮细胞。 3、其它细胞永久片的细胞形态图
实验二观察胞间连丝的形态 、实验目的 观察植物细胞间的胞间连丝,认识细胞不是“独立王国”,每个细胞与其周围 细胞有千丝万缕联系 实验原理 除极少数特化的细胞外,高等植物细胞之间通过胞间连丝相互连接,完成细 胞间的通讯联络 三、实验材料 红辣椒。 四、实验步骤 红辣椒表皮细胞临时制片:剪取一小块红辣椒→放在载玻片上→用手按住 一边→用刀片小心刮去果肉→留下一层极薄(几乎透明)的表皮→用刀片切下刮 去果肉的表皮(大小约0.3cmx0.3cm)→置于一干净载玻片上→加水一滴→盖片 →用滤纸条吸去多余的水→观察(10×,40×) 五、实验结果: 画出胞间连丝图,说明胞间连丝作用
3 实验二 观察胞间连丝的形态 一、实验目的 观察植物细胞间的胞间连丝，认识细胞不是“独立王国”，每个细胞与其周围 细胞有千丝万缕联系。 二、实验原理 除极少数特化的细胞外，高等植物细胞之间通过胞间连丝相互连接，完成细 胞间的通讯联络。 三、实验材料 红辣椒。 四、实验步骤： 红辣椒表皮细胞临时制片：剪取一小块红辣椒→放在载玻片上→用手按住 一边→用刀片小心刮去果肉→留下一层极薄（几乎透明）的表皮→用刀片切下刮 去果肉的表皮（大小约 0.3cm×0.3cm）→置于一干净载玻片上→加水一滴→盖片 →用滤纸条吸去多余的水→观察（10×，40×） 五、实验结果： 画出胞间连丝图，说明胞间连丝作用
实验三液泡系、线粒体的活体染色 、实验目的及意义:学习活体染色的方法和原理 、实验原理: 1、活体染色:用某些无毒或毒性较小的染色剂显示出细胞内某些天然构造 的真实性,而不影响细胞的生命活力,也不产生任何的物理、化学变化引起细胞 死亡,这种染色方法叫活体染色 2、液泡系、线粒体是细胞内重要的细胞器,它们通过特殊的活体染色剂染 色,可显示出生活状态下的形态结构。 3、染料: 酸性:带负电荷,易在细胞质中产生沉淀。(种类很少) 碱性;带正电荷,被普遍采用。 ①中性红染液:是液泡系特殊的活体染色剂,可将不同发育时期的液泡染 成不同深度的红色,而细胞质、细胞核不被染色。(黄豆芽)② Janus green B染 液:是对线粒体具有专一性的染料,具脂溶性,解离后,有染色能力的基团带正 电,结合在带负电的线粒体内膜上。由于线粒体内膜上细胞色素氧化酶系的作用 使染料保持氧化状态而显蓝绿色其它部分不染色。 三、实验步骤: 1:液泡系的观察 取豆芽根尖1—2cm→用双面刀→先纵切一小部分→再沿切面→长纵切根尖 切下极薄一片,尽量是一层细胞→放在载玻片上→滴中性红溶液→染色10-15 分钟→吸水纸吸去染液→滴加蒸馏水→加盖玻片→吸水纸吸去多余的水份→观 察液泡大小及颜色变化(10×,40×)→在分生组织区细胞没有液泡,随着细胞的 生长成熟,较大细胞中液泡小而圆、染色浓、数量多个,而成熟细胞中液泡发展 成为一个中央大液泡、颜色浅,表现为几乎整个细胞被染色。 2:线粒体分布的观察 (1)植物细胞中线粒体分布 用镊子撕洋葱内表皮(03×03cm)→置于载玻片上→滴一滴 Janus green b→ 染色30分钟→滴加蒸馏水→吸水纸吸干→盖片观察→10×观察→40×观察→载玻 片上滴加松柏油100×观察 (2)动物细胞中线粒体分布,取小鼠肝脏→放在表面皿→用 Ringer液冲洗多次 冲洗掉血水→用镊子分成4份,分别放在4个表面皿里→继续将分到的肝脏用 4
4 实验三 液泡系、线粒体的活体染色 一、实验目的及意义：学习活体染色的方法和原理。 二、实验原理： 1、活体染色；用某些无毒或毒性较小的染色剂显示出细胞内某些天然构造 的真实性，而不影响细胞的生命活力，也不产生任何的物理、化学变化引起细胞 死亡，这种染色方法叫活体染色。 2、液泡系、线粒体是细胞内重要的细胞器，它们通过特殊的活体染色剂染 色，可显示出生活状态下的形态结构。 3、染料： 酸性：带负电荷，易在细胞质中产生沉淀。（种类很少） 碱性；带正电荷，被普遍采用。 ①中性红染液：是液泡系特殊的活体染色剂，可将不同发育时期的液泡染 成不同深度的红色，而细胞质、细胞核不被染色。（黄豆芽）②Janus Green B 染 液：是对线粒体具有专一性的染料，具脂溶性，解离后，有染色能力的基团带正 电，结合在带负电的线粒体内膜上。由于线粒体内膜上细胞色素氧化酶系的作用， 使染料保持氧化状态而显蓝绿色其它部分不染色。 三、实验步骤： 1：液泡系的观察： 取豆芽根尖1—2cm →用双面刀→先纵切一小部分→再沿切面→长纵切根尖 →切下极薄一片，尽量是一层细胞→放在载玻片上→滴中性红溶液→染色 10-15 分钟→吸水纸吸去染液→滴加蒸馏水→加盖玻片→吸水纸吸去多余的水份→观 察液泡大小及颜色变化（10×，40×）→在分生组织区细胞没有液泡，随着细胞的 生长成熟，较大细胞中液泡小而圆、染色浓、数量多个，而成熟细胞中液泡发展 成为一个中央大液泡、颜色浅，表现为几乎整个细胞被染色。 2：线粒体分布的观察 （1）植物细胞中线粒体分布： 用镊子撕洋葱内表皮（0.3×0.3cm）→置于载玻片上→滴一滴 Janus Green B→ 染色 30 分钟→滴加蒸馏水→吸水纸吸干→盖片观察→10×观察→40×观察→载玻 片上滴加松柏油 100×观察。 （2）动物细胞中线粒体分布，取小鼠肝脏→放在表面皿→用 Ringer 液冲洗多次, 冲洗掉血水→用镊子分成 4 份，分别放在 4 个表面皿里→继续将分到的肝脏用
Ringer液冲洗多次,沖洗掉血水→用滤纸条吸去多余的液体→用镊子撕成小块 (约大米粒大小)(撕扯中有单个细胞掉下来)→用 Janus green b染色染液不能 完全浸没→染色30分钟不停翻动组织块,以利于呼吸→及时补充表面皿里的水 份,防止水份蒸发导致细胞悬液过浓。用吸管吸组织液(染色液)观察→加盖玻 片时(加2根头发)→10×观察→40×观察→在载玻片上滴加松柏油,100×观察 观察后用镜头纸沾二甲苯擦掉镜头及玻片上的松柏油)→ 四、作业: 1、绘图豆芽根尖液泡系的分布(100×) 2、绘图洋葱线粒体的分布(100×)。3、绘图鼠肝细胞线粒体的分布(100×)
5 Ringer 液冲洗多次,冲洗掉血水→用滤纸条吸去多余的液体→用镊子撕成小块 （约大米粒大小）（撕扯中有单个细胞掉下来）→用 Janus Green B 染色,染液不能 完全浸没→染色 30 分钟,不停翻动组织块，以利于呼吸→及时补充表面皿里的水 份，防止水份蒸发导致细胞悬液过浓。用吸管吸组织液（染色液）观察→加盖玻 片时（加 2 根头发）→10×观察→40×观察→在载玻片上滴加松柏油，100×观察 （观察后用镜头纸沾二甲苯擦掉镜头及玻片上的松柏油）→ 四、作业： 1、绘图豆芽根尖液泡系的分布（100×）。 2、绘图洋葱线粒体的分布（100×）。3、绘图鼠肝细胞线粒体的分布（100×）