②滤膜染色法一定量样品过滤到滤膜上，然后染色计数需要知道滤液的体积和滤膜的面积。在显微镜下计数，方法相同
②滤膜染色法 ⚫ 一定量样品过滤到滤膜上，然后染色计数。 ⚫ 需要知道滤液的体积和滤膜的面积。 ⚫ 在显微镜下计数，方法相同
比例计数法一将已知颗粒浓度的液体与待测菌液3③比例计数法按一定比例混合后在显微镜下，测各自的数目。（特点：不要求记体积）比例一一样品菌液与等体积（或成一定比例）的血液混合，观测二者比例红血球数已知（男性400~500万个/mL，女性350~450万个/mL），平均400万个/ml心红血球涂片样品溶液与等体积的血液混合如果平均每个视野中细菌数量/红血球的数量细菌比例为5.5：1，则细菌数量=？5.5×400万个/ml=2.2×107个/mL样品
③比例计数法 ◼ 比例——样品菌液与等体积（或成一定比例）的血液混合，观测二者比例 样品溶液与等体积的血液混合 涂片 如果平均每个视野中细菌数量/红血球的数量 比例为5.5：1，则细菌数量=？ 5.5×400万个/m l =2.2×107个/mL样品 红血球数已知(男性400~500万个／mL，女性350~450万个／mL)， 平均400万个/mL 细 菌 红 血 球 比例计数法——将已知颗粒浓度的液体与待测菌液 按一定比例混合后在显微镜下，测各自的数目。 （特点：不要求记体积）
全细胞染色法（死活不分）：DAPI染色，DTAFMeasurement of total cell countsDAPI:4'6-diamidino-2-phenvlindole.dihydrochloride4,6-二咪基-2苯基吲哚NH2N-CH+NH2C-NH22C1H2N:DAPI:无毒性荧光染料，能够与DAN双链强力结合并产生荧光。采用358nm紫外光照射能DNA发射明亮的蓝色荧光
DAPI:4'6-diamidino-2-phenylindole,dihydrochloride 4,6-二脒基-2苯基吲哚 DNA 2ClH2N +NH2 C N H H2N - C NH2 Measurement of total cell counts 全细胞染色法（死活不分）：DAPI染色，DTAF DAPI:无毒性荧光染料，能够 与DAN双链强力结合并产生荧 光。采用358nm紫外光照射能 发射明亮的蓝色荧光
全细胞染色法（死活不分）：DAPI染色，DTAFMeasurement of total cell counts5-DTAF:5-(4,6-dichlorotriazinyl)aminofluoresceinQH0-0ClNNHNDNANHC1OH
5-DTAF : 5-(4,6-dichlorotriazinyl) aminofluorescein DNA O OH O OH O O H NH N N Cl N Cl Measurement of total cell counts 全细胞染色法（死活不分）：DAPI染色，DTAF
有必要区分细菌的死活吗？饮用水中卫生细菌学标准是TBC<100个/mL（平板计数的标准），如果我们采用染色显微镜检测技术对刚刚加氯消毒的饮用水进行检测可能会发现细菌数量会远远超过100个/mL，是不是饮用水就是不合格的饮用水呢？
有必要区分细菌的死活吗？ ◼ 饮用水中卫生细菌学标准是TBC<100个/mL （平板计数的标准），如果我们采用染色显微 镜检测技术对刚刚加氯消毒的饮用水进行检测， 可能会发现细菌数量会远远超过100个/mL，是 不是饮用水就是不合格的饮用水呢？