活菌直接计数 （DVC, Direct Viable Counts活细胞：无色美蓝染色法云（酵母活细胞计数）死细胞：蓝色·吖啶橙（AO）染色直接计数·BacLight染色直接计数法·N.A.法?CTC染色直接计数
美蓝染色法（酵母活细胞计数） 活细胞：无色 死细胞：蓝色 活菌直接计数（DVC，Direct Viable Counts） •吖啶橙（AO）染色直接计数 •BacLight染色直接计数法 •N.A.法 •CTC染色直接计数
吖啶橙（AO）染色直接计数(AODC)活细胞：橙色荧光吖橙染色，在紫外显微镜下观察细胞的荧光死细胞：绿色荧光吖啶橙染色直接计数法（AODC）：水样采集后迅速加入甲醛固定，甲醛最终浓度2%；取10mL固定后水样加入0.5mL0.2%吖啶橙（Acridine.Orange，Sigma公司）染色i~2min.；将染色水样经滤膜（乳径0.2μm，直径25mm，黑色聚碳酸脂滤膜，Nuclepore公司）过滤；过滤后将滤膜置于载玻片上用落射荧光显微镜（白本Nikon）EF-D型）计数视野中发橙色战绿色荧光的菌体：显微镜光源为200W汞灯，激发光滤光片为450~490nm，光束分离滤光片510nm，阻挡滤光片520nm。AODC
吖啶橙（AO）染色直接计数（AODC） ◼ 吖啶橙染色直接计数法（AODC）：水样采集后迅速加入甲 醛固定，甲醛最终浓度2%；取10mL固定后水样加入 0.5mL0.2%吖啶橙（Acridine Orange，Sigma公司）染 色1~2min.；将染色水样经滤膜（孔径0.2µm，直径 25mm，黑色聚碳酸脂滤膜，Nuclepore公司）过滤；过 滤后将滤膜置于载玻片上，用落射荧光显微镜（日本Nikon， EF-D型）计数视野中发橙色或绿色荧光的菌体；显微镜光 源为200W汞灯，激发光滤光片为450~490nm，光束分离 滤光片510nm，阻挡滤光片520nm。 吖啶橙染色，在紫外显微镜下观察细胞的荧光 活细胞：橙色荧光 死细胞：绿色荧光 AODC
BacLight染色直接计数法(一种核酸探针）BacLiaht染色直接计数法：将试剂按照产品要求配制后，取2mL固定后水样加入60uL所配BacLight染色试剂，避光培养15~20分钟：然后按照AODC处理方法制片，观察计数视野中发红色或绿色荧光的菌体。所用滤光片波段同AODC相同。镜检计数视野中发绿色荧光的菌体为活菌。BacLight
BacLight染色直接计数法(一种核酸 探针 ) ◼ BacLight染色直接计数法：将试剂按照产品要 求配制后，取2mL固定后水样加入60µL所配 BacLight染色试剂，避光培养15~20分钟；然 后按照AODC处理方法制片，观察计数视野中 发红色或绿色荧光的菌体。所用滤光片波段同 AODC相同。 ◼ 镜检计数视野中发绿色荧光的菌体 为活菌。 BacLight
N.A.法向水样中加入0.002%萘啶酮酸（NA，NalidixicAcid，Fluka公司）和0.025%酵母膏（均为最终浓度），避光，25℃培养6h，然后2%甲醛固定，再按照AODC法直接镜检计数。视野中长大或变粗的菌体被认为是活菌。N.A
N.A.法 ◼ 向水样中加入0.002%萘啶酮酸（NA， Nalidixic Acid，Fluka公司）和0.025%酵母膏 （均为最终浓度），避光，25℃培养6h，然后 2%甲醛固定，再按照AODC法直接镜检计数。 视野中长大或变粗的菌体被认为是活菌。 N.A
活菌计数CTC染色直接计数将0.2mL1.67%的CTC加入10mL水样中（CTC最终浓度1mM，避光室温培养4h，然后2%甲醛固定，再按照AODC法直接镜检计数视野中的红色菌体。CTC
CTC染色直接计数——活菌计数 ◼ 将0.2mL1.67%的CTC加入10mL水样中（CTC 最终浓度1mM），避光室温培养4h，然后2% 甲醛固定，再按照AODC法直接镜检计数视野 中的红色菌体。 CTC