(一)计数法1、直接计数法(显微镜)①涂片染色法:一定量样品涂布在载玻片上,染色后计数②滤膜染色法:一定量样品过滤到滤膜上,然后染色计数。③比例计数法一将已知颗粒浓度的液体与待测菌液按一定比例混合后在显微镜下,测各自的数目
(一) 计数法 1、直接计数法(显微镜) ①涂片染色法:一定量样品涂布在载玻片上,染色后计数。 ②滤膜染色法:一定量样品过滤到滤膜上,然后染色计数。 ③比例计数法——将已知颗粒浓度的液体与待测菌液按一定 比例混合后在显微镜下,测各自的数目
①涂片染色法0.1ml菌液均匀涂布,染色1cm面积每个视野的面积计数每个视野细菌的平均数量由目测微尺的单L细菌数量=视野中的菌液体积元格量出,视野X×个/mL中菌液的体积按比例折算目镜中的视野1视野菌液(ml)=(0.1ml/1cm2)*视野面积(cm)
①涂片染色法 1视野菌液(ml)=(0.1ml/1cm2 )*视野面积(cm2 ) 0.1ml 菌液均 匀涂布,染色 面积 1cm2 计数 每个视野细菌的平均数量 细菌数量= 视野中的菌液体积 = ××个/mL 目镜中的视野 每个视野的面积 由目测微尺的单 元格量出,视野 中菌液的体积按 比例折算
Coverglass(c)Numberof cells permilliliterofbacterial suspension:14cells×20,000,0002.8×108cells/ml(a)Microbial suspension isaddedhere,being careful nottoallowoverflow.Thewholegridhas25largesquares(b)Microscopiccount:all cellsin several large squaresarecountedand thenumbersaveraged.The large squareshown herehas14bacterialcells
测定法计数器(血球计数板)每小格长宽1×1mm盖玻片每小格深0.1mm计数板计数格=4×4=16大格1大格=5×5=25小格血球计数板1小格=0.05mm×0.05mm=0.0025mm2总体积=16×25×0.0025×0.1=0.1mm3=1×10mL菌液滴染色(或不染色)■1×10-4ml菌液血球计数板
计数器(血球计数板)测定法 计数格=4×4=16 大格 血球计数板 1 大格=5×5=25 小格 1 小格=0.05mm×0.05mm=0.0025mm2 总体积=16×25×0.0025×0.1=0.1mm3 =1×10-4mL 每小格长宽 1×1mm 每小格深 0.1mm 盖玻片 计数板 菌液滴 染色(或不染色) 面积 1cm2 血球计数板 1×10-4 ml菌液
数数细菌(或其他微生物或细胞)类数目,(一般数16×5=80个小格),折算样品细菌浓度:数了80个小格中有120个细菌,样品中的细菌浓度是多少?/1×10-4(120 个 ÷80)×400ml=600× 104个/ml适用范围:测定个体较大的细菌或原生动物细菌个体若太小、过多,由于每一小格中细菌层层叠加,相互遮挡,难以准确计数
数了80个小格中有120个细菌,样品中的细菌浓度是多少? (120 个 ÷80)×400 / 1×10-4 ml =600×104个/ml 适用范围:测定个体较大的细菌或原生动物 细菌个体若太小、过多,由于每一小格中细 菌层层叠加,相互遮挡,难以准确计数。 数数细菌(或其他微生物或细胞)数目,(一般数 16×5=80个小格),折算样品细菌浓度;