*(1)平板菌落计数:好氧菌、厌 氧菌均可(实验) (a)The pou The spe 菌样稀释→浇注平板→倒置培 养→统计菌落形成单位cfu→乘以 empty plate 稀释倍数→菌样含菌数 优点:结果较为精确 Ada melted nutnant精0a 缺点:方繁琐法 ○Swin to mi 用活菌指示剂TTC(2,3,5 氯化三苯基四氮唑)可使菌 落在短时间内形成玫瑰红 色一快速鉴定 细菌总数快速测定仪等
(1)平板菌落计数:好氧菌、厌 氧菌均可(实验) 菌样稀释→浇注平板→倒置培 养→统计菌落形成单位cfu→乘以 稀释倍数→菌样含菌数 优点:结果较为精确 缺点:方繁琐法 用活菌指示剂TTC(2,3,5- 氯化三苯基四氮唑)可使菌 落在短时间内形成玫瑰红 色——快速鉴定 细菌总数快速测定仪等
(2)液体稀释法: Sample to 选择适宜的3个连续的稀 1 ml be counted Dilution→ 释液各取3ML,接种到3组共9 1 ml 1 ml 1 ml 1 ml ml 支液体培养基试管中,每支 试管中介入ML,培养一段时 9-ml broth 间后,记录每个稀释度出现 生长的试管数,然后查MPN表, Plate 1-ml samples 根据样品的稀释度计算其中 活菌的含量。 此外还有DNA指纹技术和PCR 159 17 Too many coloniescoloniescolonies colonies colonies to count 扩增等快速测定的方法。 159×103 1.59×105 Plate Dilution Cells(colony- count factor forming units)per milliliter of original sample
(2)液体稀释法: 选择适宜的3个连续的稀 释液各取3ML,接种到3组共9 支液体培养基试管中,每支 试管中介入1ML,培养一段时 间后,记录每个稀释度出现 生长的试管数,然后查MPN表, 根据样品的稀释度计算其中 活菌的含量。 此外还有DNA指纹技术和PCR 扩增等快速测定的方法
第二节 微生物的生长规律 一、微生物的个体生长和同步生长 1、同步培养(synchronous culture):即设法使群体中的 所有细胞尽可能都处于同样细胞生长和分裂同期中,然后分 析此群体的各种生物化学特征,从而了解单个细胞所发生的 变化。 2、同步生长(synchronous growth):通过同步培养而使 细胞群体处于分裂步调一致的生长状态,称同步生长。 方法:①环境条件诱导法:氯霉素抑制细菌蛋白质合成; 细菌芽胞诱导发芽 ②机械筛选法:过滤法;离心法;膜洗脱法
第二节 微生物的生长规律 一、微生物的个体生长和同步生长 1、同步培养(synchronous culture):即设法使群体中的 所有细胞尽可能都处于同样细胞生长和分裂同期中,然后分 析此群体的各种生物化学特征,从而了解单个细胞所发生的 变化。 2、同步生长(synchronous growth):通过同步培养而使 细胞群体处于分裂步调一致的生长状态,称同步生长。 方法:①环境条件诱导法:氯霉素抑制细菌蛋白质合成; 细菌芽胞诱导发芽 ②机械筛选法:过滤法;离心法;膜洗脱法
单细胞微生物的典型生长曲线 1、典型生长曲线: 生长曲线:定量描述液体培养 基中微生物群体生长规律的实 验曲线。 典型生长曲线:将菌种接种在 一一总菌数 液体培养基中隔一定时间取样, 计算菌数,以菌数的对数为纵 坐标,生长时间为横坐标作图, 绘出一条包括延滞期、指数期、 稳定期和衰亡期四个阶段的曲 活菌数 线。 I W R(生长速率常数)=分裂次数 培养时间(h) (代)/单位时间 图74典型生长曲线 (【.惩滞期,1,指教期,I.稳定期,衰亡期)
二、单细胞微生物的典型生长曲线 1、典型生长曲线: 生长曲线:定量描述液体培养 基中微生物群体生长规律的实 验曲线。 典型生长曲线:将菌种接种在 液体培养基中隔一定时间取样, 计算菌数,以菌数的对数为纵 坐标,生长时间为横坐标作图, 绘出一条包括延滞期、指数期、 稳定期和衰亡期四个阶段的曲 线。 R(生长速率常数)=分裂次数 (代)/单位时间
(一)延滞期(lag phase) 或停滞期-一“万事开头难” 1.*特点: ■ 细胞数目不增加(R=0) ■ 细胞长、大 细胞内RNA尤其是rRNA含量增高 ■合成代谢旺盛,诱导酶迅速合成 ■ 对不良条件敏感 2影响延滞期长短的因素 ■菌种 ■接种龄:即“种子”的群体生长年龄,即处在生长曲线上的哪一 个阶段。 ■接种量:接种量的大小明显影响延滞期的长短。 ■培养基成分:接种到营养丰富的天然培养基中的微生物,要比接 种到营养单调的组分培养基中的延滞期短。 种子损伤度
(一)延滞期(lag phase) 或停滞期-“万事开头难” 1.特点: ◼ 细胞数目不增加(R=0) ◼ 细胞长、大 ◼ 细胞内RNA尤其是rRNA含量增高 ◼ 合成代谢旺盛,诱导酶迅速合成 ◼ 对不良条件敏感 2.影响延滞期长短的因素 ◼ 菌种 ◼ 接种龄:即“种子”的群体生长年龄,即处在生长曲线上的哪一 个阶段。 ◼ 接种量:接种量的大小明显影响延滞期的长短。 ◼ 培养基成分:接种到营养丰富的天然培养基中的微生物,要比接 种到营养单调的组分培养基中的延滞期短。 ◼ 种子损伤度