平板菌落计数法 1ml 9ml 9ml 1ml 1ml m ×22 最常用的活菌计数法。 将适当稀释的菌液倾注平板或涂布在平板表面,经保 温培养后,以平板上出现的菌落数乘以稀释度就可 以计算出原菌液的含菌量。 直径9cm的培养皿平板上出现菌落数一般以50~500为 宜。按照国家标准规定的样品菌落总数测定的计数 原则,以平板菌落数在30~300之间为报告依据
平板菌落计数法 最常用的活菌计数法。 将适当稀释的菌液倾注平板或涂布在平板表面,经保 温培养后,以平板上出现的菌落数乘以稀释度就可 以计算出原菌液的含菌量。 直径9cm的培养皿平板上出现菌落数一般以50~500为 宜。按照国家标准规定的样品菌落总数测定的计数 原则,以平板菌落数在30~300之间为报告依据。 9ml 9ml 9ml 9ml 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml 1ml ×2 ×2 ×2
4、干重测定法 将一定量的菌液中的菌体通过离心或过滤分离 出来,然后烘干(干燥温度可采用105℃、100℃或 80℃)、称重。一般干重为湿重的10%一20%,而 一个细菌细胞一般重约10-12一10-13g。 该法适合菌浓较高的样品。 如大肠杆菌一个细胞一般重约1012~10-13g,液体培 养物中细胞浓度达到2×109个/ml时,100ml培养 物可得10`90mg干重的细胞
4、干重测定法 将一定量的菌液中的菌体通过离心或过滤分离 出来,然后烘干(干燥温度可采用105℃、100℃或 80℃)、称重。一般干重为湿重的10%—20%,而 一个细菌细胞一般重约10-12—10-13g。 该法适合菌浓较高的样品。 如大肠杆菌一个细胞一般重约10–12~10–13g,液体培 养物中细胞浓度达到2×109个/ml时,100ml培养 物可得10~90mg干重的细胞
5、菌丝长度测定法 该法适用于对丝状真菌生长长度的测定。 方法:将真菌接种在固体培养基的平皿中央,定 时测定菌落的直径或面积,直到菌落覆盖整个 平皿。 缺点:不能反映菌丝的纵向生长,不能计算菌落 的厚度和培养集中的菌丝。接种量也能影响结 果,不能反映菌丝的总量。 也可用U型管培养法,该法方便不易污染,但通 气不良
5、菌丝长度测定法 该法适用于对丝状真菌生长长度的测定。 方法:将真菌接种在固体培养基的平皿中央,定 时测定菌落的直径或面积,直到菌落覆盖整个 平皿。 缺点:不能反映菌丝的纵向生长,不能计算菌落 的厚度和培养集中的菌丝。接种量也能影响结 果,不能反映菌丝的总量。 也可用U型管培养法,该法方便不易污染,但通 气不良
6、细胞堆积体积测定法 方法:将细胞悬浮液装入毛细沉淀管内,离心, 根据堆积体积计算含菌量。 该法快速、简便,培养液中如有其他固体颗粒, 则误差较大。 也可以用有刻度的离心管离心,通过所得的沉淀 体积推算出细胞的质量
6、细胞堆积体积测定法 方法:将细胞悬浮液装入毛细沉淀管内,离心, 根据堆积体积计算含菌量。 该法快速、简便,培养液中如有其他固体颗粒, 则误差较大。 也可以用有刻度的离心管离心,通过所得的沉淀 体积推算出细胞的质量
7、电子计数器法 方法:在计数器中放有电解质及两个电极,将电 极一端放入带微孔的小管,通电抽真空,使含 有菌体的电解质从小孔进入管内。当细胞通过 小孔时,电阻增大,电阻增大会引起脉冲变化, 则每个细胞通过时均被记录下来。因样品的体 积已知,故可以计算菌体的浓度,同时菌体的 大小与电阻的大小成正比。 该方法方便、快捷,但不能测定含有颗粒的菌液, 对链状和丝状菌无效
7、电子计数器法 方法:在计数器中放有电解质及两个电极,将电 极一端放入带微孔的小管,通电抽真空,使含 有菌体的电解质从小孔进入管内。当细胞通过 小孔时,电阻增大,电阻增大会引起脉冲变化, 则每个细胞通过时均被记录下来。因样品的体 积已知,故可以计算菌体的浓度,同时菌体的 大小与电阻的大小成正比。 该方法方便、快捷,但不能测定含有颗粒的菌液, 对链状和丝状菌无效