常规法是： (1)离心收集对数期细菌，悬于预 冷CaC1,溶液中（原培养液1/2体 积)，离心后重悬细菌（原培养液 1/5的CaCl,)
常规法是： (1)离心收集对数期细菌，悬于预 冷CaCl2溶液中（原培养液1/2体 积），离心后重悬细菌(原培养液 1/5的CaCl2)
(2)细菌悬液和一定量的待转化 质粒DNA或噬菌体DNA混合，O℃放置 30分钟，42℃热冲击90秒，快速冷 却，加适量LB培养基，37℃使冻存 的细菌复苏，涂布到原抗生素的选 择培养基上筛选转化子
(2)细菌悬液和一定量的待转化 质粒DNA或噬菌体DNA混合，0℃放置 30分钟，42℃热冲击90秒，快速冷 却, 加适量LB培养基，37℃使冻存 的细菌复苏，涂布到原抗生素的选 择培养基上筛选转化子
使用不同组合的二价阳离子混合液 (Ca2+,Mn2+)。延长CaCl,处理菌的时 间或加用二甲亚砜(DMS0)等试剂辅 助处理菌等，可提高转化效率至100- 1000倍 本法适用于大多数大肠杆菌的转化
使用不同组合的二价阳离子混合液 （Ca2+，Mn2+）。延长CaCl2处理菌的时 间 或加用二甲亚砜（DMSO）等试剂辅 助处理菌等，可提高转化效率至100- 1000倍。 本法适用于大多数大肠杆菌的转化
原理： CaCl,处理细菌，使其变为短暂的“感受 态形式，可以摄取不同来源的DNA。 但CaCl,的作用机理或DNA如何进入感受 态细菌的过程，仍尚不清楚。 影响转化的因素主要与细菌种类、细 菌的生长状态，CaCl,的浓度及处理的时间 等
原理： CaCl2处理细菌，使其变为短暂的“感受 态”形式，可以摄取不同来源的DNA。 但CaCl2的作用机理或DNA如何进入感受 态细菌的过程，仍尚不清楚。 影响转化的因素主要与细菌种类、细 菌的生长状态，CaCl2的浓度及处理的时间 等
碱金属离子(Li+、Na、Rb+、Cs)能 较好诱导酿酒酵母产生感受态，特别是 LiGI和LiAc对含有arsI复制起始区的质粒 其转化效率分别表达230转化子/μgDNA和 400转化子/μgDNA。 碱金属的转化机制尚尚不清楚。有人酵 母细胞较好提出化学渗透学说。LiAc对酿 酒酵母效果好，而LiC1则对甲醇营养型
碱金属离子（ Li+、Na+、Rb+、Cs+）能 较好诱导酿酒酵母产生感受态，特别是 LiCl和LiAc对含有arsl复制起始区的质粒， 其转化效率分别表达230转化子/μgDNA和 400转化子/μgDNA。 碱金属的转化机制尚尚不清楚。有人酵 母细胞较好提出化学渗透学说。LiAc对酿 酒酵母效果好，而LiCl则对甲醇营养型