磷酸暖冲液 外DNA 这种方法是受二价金属离 将DNA加到细惠中 加入氯化 子能促进细胞吸收外源 DNA沉淀 DNA的启发而发展起来的。 添加新鲜培养液 当核酸以磷酸钙一DNA共 沉淀物的形式在时,细胞 摄取DNA的能力显著加强。 阶去DNA溶 但转移效率较低,仅有 1%-5%的外源DNA可以 进入受体细胞核中,大约 仅有1%的DNA可以在细 胞中稳定表达。 磷酸钙一DNA共沉淀法基因转移技术
磷酸钙—DNA共沉淀法基因转移技术 这种方法是受二价金属离 子能促进细胞吸收外源 DNA的启发而发展起来的。 当核酸以磷酸钙—DNA共 沉淀物的形式在时,细胞 摄取DNA的能力显著加强。 但转移效率较低,仅有 1%~5%的外源DNA可以 进入受体细胞核中,大约 仅有1%的DNA可以在细 胞中稳定表达
蜜质溶液 将需要转移的外源DNA 外源DNA 混合 脂质双层 或RNA包裹于脂质体内, DNA包表 进脂质体内 由于脂质体具有磷脂双层 加人细影巾 结构,与细胞膜类似,因 此可以与受体细胞膜融合, 脂质双与 展融台 从而将外源DNA转入宿 DN 主细胞。这种方法转基因 核中的DNA 效率高。 脂质载体包埋法
脂质载体包埋法 将需要转移的外源DNA 或RNA包裹于脂质体内, 由于脂质体具有磷脂双层 结构,与细胞膜类似,因 此可以与受体细胞膜融合, 从而将外源DNA转入宿 主细胞。这种方法转基因 效率高
转染似装细前系 外源DNA 包装 反转录我体DNA 组表达病*白 做体NA被包装成 感染性病毒粒子 ,我体RNA 分肉病毒粒子都 深 选样感兴 -RNA 趣的细克 逆转录 作用 双结 DNA DNA环化 经 DNA 外源基因表达 截体DNA稳定地整 合到染色体DNA上 病毒介导的生物学方法
病毒介导的生物学方法
第二节转基因动物的方法
第二节 转基因动物的方法
•反转录病毒法 基因显微注射法 •胚胎干细胞移植法
•反转录病毒法 •基因显微注射法 •胚胎干细胞移植法