一、基因的显微注射法
一、基因的显微注射法
何为显微注射? 显微注射就是借助光学显微镜的放大作用,利用显微操 作仪,直接把DNA注射到动物早期胚胎、胚胎干细胞、体细 胞或卵母细胞中,然后生产动物个体的技术。经过显微注射 DNA发育而成的动物中,有少数整合了被注射的DNA分子, 成为转基因动物
何为显微注射? 显微注射就是借助光学显微镜的放大作用,利用显微操 作仪,直接把DNA注射到动物早期胚胎、胚胎干细胞、体细 胞或卵母细胞中,然后生产动物个体的技术。经过显微注射 DNA发育而成的动物中,有少数整合了被注射的DNA分子, 成为转基因动物
DNA显微注射法的基本程序 >通过激素疗法使小鼠超数排卵,开始时注射雌性妊娠血清,48小时后再注 射人绒毛膜促进腺激素,这时小鼠便会超数排卵,一般情况下5-10个,超 数排卵为35个; >与雄性小鼠交配,然后杀掉小鼠,从其输卵管内取出受精卵; >将经纯化的转基因样品迅速注射入受精卵中变大的雄性原核内; >将25-40个注射了转基因的受精卵移植入代孕小鼠体内; >受精卵发育成胚胎,并繁殖成转基因小鼠子代: >从小鼠子代体内取出DNA样品,进行杂交,鉴定转基因的整合与否及位 点; >子代小鼠间进行再交配,繁殖,观察转基因是否遗传及表达
➢通过激素疗法使小鼠超数排卵,开始时注射雌性妊娠血清,48小时后再注 射人绒毛膜促进腺激素,这时小鼠便会超数排卵,一般情况下5-10个,超 数排卵为35个; ➢与雄性小鼠交配,然后杀掉小鼠,从其输卵管内取出受精卵; ➢将经纯化的转基因样品迅速注射入受精卵中变大的雄性原核内 ; ➢将25-40个注射了转基因的受精卵移植入代孕小鼠体内 ; ➢受精卵发育成胚胎,并繁殖成转基因小鼠子代; ➢从小鼠子代体内取出DNA样品,进行杂交,鉴定转基因的整合与否及位 点 ; ➢子代小鼠间进行再交配,繁殖,观察转基因是否遗传及表达。 DNA显微注射法的基本程序
受情柳 8 pcr 通过DNA显微注射获得转基因小鼠示图
通过DNA显微注射获得转基因小鼠示图
受精卵 负压周定管 苏原深出 注射针 植入代小母鼠 嵌合小鼠 杂交、筛选 纯合转基因小鼠