五、方法步骤 1.接种环境的处理 (1)接种箱的熏蒸:先用2%来苏清洁接种 箱内外,放入接种所需的物品,用甲醛熏 蒸。每立方米空间一般用甲醛10m,加 半量高锰酸钾(5~7g)使甲醛氧化挥发。 先将高锰酸钾放入接种箱内的容器中,再 注入甲醛,立即产生强烈刺激的甲醛气体 熏蒸25-30min
五、方法步骤 1.接种环境的处理 （1）接种箱的熏蒸： 先用2%来苏清洁接种 箱内外，放入接种所需的物品，用甲醛熏 蒸。每立方米空 间 一般用甲醛10ml，加 半量高锰酸钾（5~7g）使甲醛氧化挥发。 先将高锰酸钾放入接种箱内的容器中，再 注入甲醛，立即产生强烈刺激的甲醛气体。 熏蒸25--30min
(2)超净工作台的消毒:用消毒液擦拭台面后放置接种所 需物品,开启超净工作台上的紫外灯,照射20-30分后使 用 2母种的转管技术 (1)手及菌种管的消毒:用肥皂洗手,再用75%酒精棉球 擦手和菌种管表面,在酒精灯焰上略烧试管外的棉塞 后,立即将菌种管放入接种箱内 (2)转管:两手从接种孔伸人接种箱内,酒精棉球擦拭接 种环。左手持菌种管和斜面管,两支试管口对齐于火焰上 方。右手持接种环或针和铲等,并将其在灯焰上干热灭菌, 用小指及无名指拔掉棉塞,接种环冷却后伸入菌种管内取 略豆粒大菌种块,迅速移人斜面培养基的中部。然后将棉 塞在火焰上烧一下,立即塞入试管口,旋紧棉塞。接种环 不要触碰管口及管壁。接种后的试管应立即贴标签,注明 菌种名称及接种日期,再进行适温培养
（2）超净工作台的消毒：用消毒液擦拭台面后放置接种所 需物品，开启超净工作台上的紫外灯，照射20-30分后使 用。 2.母种的转管技术 （1）手及菌种管的消毒：用肥皂洗手，再用75％酒精棉球 擦手和菌种管表面，在酒精灯焰上略烧试 管 外的棉塞 后，立即将菌种管放入接种箱内。 （2）转管：两手从接种孔伸人接种箱内，酒精棉球擦拭接 种环。左手持菌种管和斜面管，两支试管口对齐于火焰上 方。右手持接种环或针和铲等，并将其在灯焰上干热灭菌， 用小指及无名指拔掉棉塞，接种环冷却后伸入菌种管内取 略豆粒大菌种块，迅速移人斜面培养基的中部。然后将棉 塞在火焰上烧一下，立即塞入试管口，旋紧棉塞。接种环 不要触碰管口及管壁。接种后的试管应立即贴标签，注明 菌种名称及接种日期，再进行适温培养
G 母种转管过程
母 种 转 管 过 程
六、作业1、何谓无菌操作、消毒?消毒分哪几种类型? 2、同学相互评比接种结果分析自己接种成败的原因
六、作业 1、何谓无菌操作、消毒？消毒分哪几种类型？ 2、同学相互评比接种结果 分析自己接种成败的原因
实验三、食用菌母种制作分离技术 、目的要求 1、明确食用菌无菌操作技术要点。2、掌握食用 菌母种分离技术。 基本原理:食用菌母种分离方法较多,但主要 采用组织和孢子分离,所不同的是前者取子实体 某块组织,后者取子实体的孢子经过培养形成的 纯菌丝体(纯种)。 、实验准备 1材料:空白斜面培养基空白培养无菌.食用菌子 实体等 2器具:酒精灯、接种环、火柴、尖头镊、酒精棉 球、大镊子、接种箱、超净工作台、高锰酸钾 37%甲醛溶液、紫外灯、2%来苏水、标签纸等
实验三、食用菌母种制作分离技术 一、目的要求 1、明确食用菌无菌操作技术要点。 2、掌握食用 菌母种分离技术。 二、基本原理：食用菌母种分离方法较多，但主要 采用组织和孢子分离，所不同的是前者取子实体 某块组织，后者取子实体的孢子经过培养形成的 纯菌丝体（纯种）。 三、实验准备 1.材料：空白斜面培养基(空白培养无菌).食用菌子 实体等 2.器具： 酒精灯、接种环、火柴、尖头镊、酒精棉 球、大镊子、接种箱、超净工作台、高锰酸钾 37％甲醛溶液、紫外灯、2%来苏水、标签纸等