氨基酸光学活性和光谱性质 1、旋光性:除甘氨酸外,所有天然α-氨基酸都有不对称碳原子 ,因此所有天然氨基酸都具有旋光性。 2、紫外吸收光谱:参与蛋白质组成的20种氨基酸中色氨酸 (Trp)、酪氨酸(Iyr)和苯丙氨酸(Phe)的R基团中含有苯环共轭双 键系统,在紫外光区显示特征的吸收谱带,最大光吸收(max )分别为280、275、和257nm。由于大多数蛋白质都含有这些 氨基酸残基,因此用紫外分光光度法可测定蛋白质含量。 3、核磁共振( nuclear magnetic resonance,NMR)波谱:原子 核带有正电荷,只要自旋量子数不等于零,其行为就象饶轴自 旋的小磁体,因而能与外加磁场相互作用,产生核磁共振。例 如、13C、H、14H、32P的核都属于这一类
氨基酸光学活性和光谱性质 1、旋光性:除甘氨酸外,所有天然α-氨基酸都有不对称碳原子 ,因此所有天然氨基酸都具有旋光性。 2、紫外吸收光谱:参与蛋白质组成的20种氨基酸中色氨酸 (Trp)、酪氨酸(Tyr)和苯丙氨酸(Phe)的R基团中含有苯环共轭双 键系统,在紫外光区显示特征的吸收谱带,最大光吸收(max )分别为280、275、和257nm。由于大多数蛋白质都含有这些 氨基酸残基,因此用紫外分光光度法可测定蛋白质含量。 3、核磁共振(nuclear magnetic resonance,NMR)波谱:原子 核带有正电荷,只要自旋量子数不等于零,其行为就象饶轴自 旋的小磁体,因而能与外加磁场相互作用,产生核磁共振。例 如3H、 13C、 2H、 14H、 32P的核都属于这一类
40 l0,00 Phe 0 T 的紫外吸收光谱 摩尔吸 00 T 收系数 20 00 Ph he 20 200220240260280300320 波长
Try Tyr Phe 的紫外吸收光谱 摩尔吸收系数 波长
氨基酸与2,4一二硝基氟苯(①NB)的反应 ( sanger反应) NO2 F HN-CR ON COOH dnFB (dinitrofluorobenzene) 氨基酸 弱硷中 NO2 H nccooh t he ON- H R DNP-AA(黄色)
氨基酸与2,4一二硝基氟苯(DNFB)的反应 (sanger反应) DNFB(dinitrofiuorobenzene) DNP-AA(黄色) + + HF 弱硷中 氨基酸
氨基酸与苯异硫氰酯(PITC)的反应 ( Edman反应) N=CS H2N-CH-COOH R Pitc (phenylisothiocyanate) 弱硷中 (400C) H HO CO SC HR (硝基甲烷40C) SC C-H H R H 苯乙内酰硫脲衍生物PTH-AA H (phenylisothiohydantion-AA)
氨基酸与苯异硫氰酯(PITC)的反应 (Edman反应) PITC(phenylisothiocyanate) + 苯乙内酰硫脲衍生物(PTH-AA) (phenylisothiohydantion-AA) 弱硷中 (400 C) (硝基甲烷 400 C) H+
氨基酸与茚三酮反应 0 OH POH-C0OH加热 OH (弱酸 + co OH RCHO 还原性茚三酮 茚三酮(无色) ONH OH HO 2NH2+ OH HO 0 0 3H20 还原性茚三酮 还原性茚三酮 紫色化合物
氨基酸与茚三酮反应 + 3H20 茚三酮(无色) NH3 CO2 RCHO + 还原性茚三酮 紫色化合物 (弱酸) 加热 + 2NH3 + 还原性茚三酮 还原性茚三酮