上游充通大警 Shanghai Jiao Tong University FLASH 革兰氏染色过程 Stop 1 1、用碱性染料结晶紫对菌液涂片进行初染 Flood the heat-fixed smear with crystal violet tor 1 minute All colls purplo 2、用碘液进行媒染。 Stop 2 Add iodine solution for 3 minutes 3、用乙醇冲洗进行脱色。在经历脱色后 All cells remain purple 仍将结晶紫保留在细胞内的为革兰氏阳性细 Step 3 菌，而革兰氏阴性细菌的结晶紫被洗掉，细 Decolorize with alcohol brfofly about 20 seconds 胞呈无色。 Gram-positive cells are purplo: Gram-negative colls are colortess 4、用碱性染料沙黄进行复染。例如，它使革 兰氏阴性细菌最后呈现桃红到红色，而革兰氏 Stop 4 Counterstain with 阳性细菌保持深紫色 safranin for 1 to 2 mnutos Gram positive cells are purple: Placo drop of oil on slido: Gram-nogative cells examine with 100 x objecuvo aro tod Stalning colls for microscoplo obsorvation
Shanghai Jiao Tong University 革兰氏染色过程 1、用碱性染料结晶紫对菌液涂片进行初染 2、用碘液进行媒染。 3、用乙醇冲洗进行脱色。在经历脱色后 仍将结晶紫保留在细胞内的为革兰氏阳性细 菌，而革兰氏阴性细菌的结晶紫被洗掉，细 胞呈无色。 4、用碱性染料沙黄进行复染。例如，它使革 兰氏阴性细菌最后呈现桃红到红色，而革兰氏 阳性细菌保持深紫色 FLASH
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上浒克通大睾 Shanghai Jiao Tong University 革兰氏阳性和阴性细菌细胞壁成分的比较 成分 占细胞璧干重的% 革兰氏阳性细菌 革兰氏阴性细菌 肽聚糖 含量很高(50~90) 含量很低(~10) 磷壁酸 含量较高(<50) 无 类脂质 般无(<2) 含量较高(~20) 蛋白质 无 含量较高
Shanghai Jiao Tong University 成分 占细胞壁干重的% 革兰氏阳性细菌 革兰氏阴性细菌 肽聚糖 含量很高（50~90） 含量很低（~10） 磷壁酸 含量较高（＜50） 无 类脂质 一般无（＜2） 含量较高（~20） 蛋白质 无 含量较高 革兰氏阳性和阴性细菌细胞壁成分的比较
成分 占细胞壁干重的% 革兰氏阳性细菌 革兰氏阴性细菌 肽聚糖 含量很高(50-90) 含量很低(~10) 磷壁酸 含量较高(<50) 无 类脂质 一般无(<2) 含量较高(~20) 蛋白质 无 含量较高 Gram Positive Gram Negative Lipotechoic acid Polysaccharides Porins Techoic adid Upids Protein Outer Peptidoglycan membrane layer Peptidoglycan Periplasmic space Cell membrane Membrane Cell protein membrane Membrane protein
成分 占细胞壁干重的% 革兰氏阳性细菌 革兰氏阴性细菌 肽聚糖 含量很高（50~90） 含量很低（~10） 磷壁酸 含量较高（＜50） 无 类脂质 一般无（＜2） 含量较高（~20） 蛋白质 无 含量较高
上气通大学 Shanghai Jiao Tong University (2)革兰氏阳性细菌的细胞壁 特点：厚度大(2080nm)；化学组分简单，一般只含 90%肽聚糖和10%磷壁酸。 Teichoic acid Wall associated protein Lipoteichoic acid 0— Peptidoglycan Cytoplasmic 资行 888好奶 membrane 88 8B88 88
Shanghai Jiao Tong University （2）革兰氏阳性细菌的细胞壁 特点：厚度大（20~80nm）；化学组分简单，一般只含 90%肽聚糖和10%磷壁酸