（二）利用吸收光谱对物质进行定量分析 1．原理 Beer-Lambert（比尔）定律： T=I/I0 A=lg1/T=lgI0 /I A=KCL 其中：T为透光率；A为吸光率；I0为入射 光强度；I为透射光强度； K为吸收系数；C为溶液浓度；L为溶液光 程的厚度
（二）利用吸收光谱对物质进行定量分析 1．原理 Beer-Lambert（比尔）定律： T=I/I0 A=lg1/T=lgI0 /I A=KCL 其中：T为透光率；A为吸光率；I0为入射 光强度；I为透射光强度； K为吸收系数；C为溶液浓度；L为溶液光 程的厚度
2．常用方法 （1）标准曲线法 OD或Ａ 浓度 标准曲线与样品的测定条件必须一致
2．常用方法 （1）标准曲线法 OD或Ａ 浓度 标准曲线与样品的测定条件必须一致
（2）标准管法 CX /AX=CS /AS，已知CS，测定AS、AX，可 求得CX。 （3）摩尔吸光系数法 C=A/（为L=1cm，C为1 mol/L时的 吸光系数，也称为摩尔吸光系数
（2）标准管法 CX /AX=CS /AS，已知CS，测定AS、AX，可 求得CX。 （3）摩尔吸光系数法 C=A/（为L=1cm，C为1 mol/L时的 吸光系数，也称为摩尔吸光系数
(三)米氏常数的测定原理 酶促反应v-[S]曲线 v [S] 推导出米氏方程为： 其中[S]为底物浓度；v为初速度；Vm为最大反应速度； Km 为米氏常数 [ ] [ ] K S V S v m m + =
(三)米氏常数的测定原理 酶促反应v-[S]曲线 v [S] 推导出米氏方程为： 其中[S]为底物浓度；v为初速度；Vm为最大反应速度； Km 为米氏常数 [ ] [ ] K S V S v m m + =