• 从增殖的角度来看,可将高等动物的细胞分为三类: – ①连续分裂细胞,如表皮生发层细胞、部分骨髓细胞。 – ②休眠细胞暂不分裂,但在适当的刺激下可重新进入细胞周期, 称G0期细胞,如淋巴细胞、肝、肾细胞等。 – ③不分裂细胞,指不可逆地脱离细胞周期,不再分裂的细胞,又 称终端细胞,如神经、肌肉、多形核细胞等
• 从增殖的角度来看,可将高等动物的细胞分为三类: – ①连续分裂细胞,如表皮生发层细胞、部分骨髓细胞。 – ②休眠细胞暂不分裂,但在适当的刺激下可重新进入细胞周期, 称G0期细胞,如淋巴细胞、肝、肾细胞等。 – ③不分裂细胞,指不可逆地脱离细胞周期,不再分裂的细胞,又 称终端细胞,如神经、肌肉、多形核细胞等
• 细胞周期的时间长短与物种的细胞类型有关。通常G1期持 续时间差异较大,M期最短约0.5~4.5小时。 • 标记有丝分裂百分率法(percentage labeled mitoses, PLM):对测定细胞进行脉冲标记、定时取材、利用放射 自显影技术显示标记细胞,通过统计标记有丝分裂细胞百 分数的办法来测定细胞周期。放射标记物为3H或者14C标 记的TDR。 二、细胞周期时间的测定
• 细胞周期的时间长短与物种的细胞类型有关。通常G1期持 续时间差异较大,M期最短约0.5~4.5小时。 • 标记有丝分裂百分率法(percentage labeled mitoses, PLM):对测定细胞进行脉冲标记、定时取材、利用放射 自显影技术显示标记细胞,通过统计标记有丝分裂细胞百 分数的办法来测定细胞周期。放射标记物为3H或者14C标 记的TDR。 二、细胞周期时间的测定
50 100 TG2 0 TM Ts Tc TG2 +1/2TM T PLM 常以(TG2+1/2TM)-TG2的方式求出TM
50 100 TG2 0 TM Ts Tc TG2 +1/2TM T PLM 常以(TG2+1/2TM)-TG2的方式求出TM
• 细胞同步化(synchronization)是指在自然过程中发生或经 人为处理造成的细胞周期同步化。 • (一)自然同步化 • 1、多核体:如:粘菌、疟原虫。 • 2、某些水生动物的受精卵:如海胆、海参、两栖类。 • 3、增殖抑制解除后的同步分裂:如真菌的休眠孢子移入 适宜环境后,它们一起发芽,同步分裂。 三、细胞同步化
• 细胞同步化(synchronization)是指在自然过程中发生或经 人为处理造成的细胞周期同步化。 • (一)自然同步化 • 1、多核体:如:粘菌、疟原虫。 • 2、某些水生动物的受精卵:如海胆、海参、两栖类。 • 3、增殖抑制解除后的同步分裂:如真菌的休眠孢子移入 适宜环境后,它们一起发芽,同步分裂。 三、细胞同步化
• 1、选择同步化 • 1)有丝分裂选择法:M期细胞与培养皿的附着性低,振荡 脱离器壁收集。 – 优点:操作简单,同步化程度高,细胞不受药物伤害。 – 缺点:获得的细胞数量较少(分裂细胞约占1%~2%) 。 • 2)细胞沉降分离法: M期细胞体积大,可用离心分离。 – 优点:可用于任何悬浮培养的细胞。 – 缺点:同步化程度较低。 (二)人工同步化
• 1、选择同步化 • 1)有丝分裂选择法:M期细胞与培养皿的附着性低,振荡 脱离器壁收集。 – 优点:操作简单,同步化程度高,细胞不受药物伤害。 – 缺点:获得的细胞数量较少(分裂细胞约占1%~2%) 。 • 2)细胞沉降分离法: M期细胞体积大,可用离心分离。 – 优点:可用于任何悬浮培养的细胞。 – 缺点:同步化程度较低。 (二)人工同步化