二、体内样品的米集与制备TDM测定S代替P进行临床监测1.睡液的组成腮腺，舌下腺和颌1.样品的制备下腺制成水性基质2.睡液的采集匀浆溶液漱口15min，安静状态，自然流出的唾2.样品的处理液(1)沉淀蛋白法物理或化学方法刺(2)酸/碱水解法激(3)酶水解法3.样品的制备蛋白水解酶中3000r/min离心的枯草菌溶素10min，上清液>睡液>组织常见体内样品2025/8/15
2025/8/15 常见体内样品 11 TDM测定S代替P进行 临床监测 1. 唾液的组成 腮腺, 舌下腺和颌 下腺 2. 唾液的采集 漱口15min, 安静状 态, 自然流出的唾 液 物理或化学方法刺 激 3. 样品的制备 3000r/min离心 10min,上清液 1. 样品的制备 制成水性基质 匀浆溶液 2. 样品的处理 (1)沉淀蛋白法 (2)酸/碱水解法 (3)酶水解法 蛋白水解酶中 的枯草菌溶素 ➢唾液 ➢组织 二、体内样品的采集与制备
三、体内样品的贮存与处理冷藏与冷冻短期保存：冰箱（4℃）冷藏长期保存：冷柜（-20C/-70~-80C）冷冻，小体积分装1.血浆/血清：分离（+2h），硬质玻璃/聚乙烯管（EP）冷冻2.尿样：冷藏（24~36h）加防腐剂3.睡液：冷冻保存时，解冻后充分搅匀后再用去活性（二）采样后立即终止酶的活性常用方法：液氮速冻，微波照射，匀浆沉淀，加酶活性阻断剂（氟化钠）或抗氧剂(VC），煮沸2025/8/15
2025/8/15 12 三、体内样品的贮存与处理 (一) 冷藏与冷冻 短期保存: 冰箱(4℃)冷藏 长期保存: 冷柜(-20℃/-70~-80℃)冷冻, 小体积分装 1. 血浆/血清: 分离(≯2h), 硬质玻璃/聚乙烯管(EP), 冷冻 2. 尿样: 冷藏(24~36h)加防腐剂 3. 唾液: 冷冻保存时, 解冻后充分搅匀后再用 (二) 去活性 采样后立即终止酶的活性 常用方法: 液氮速冻, 微波照射, 匀浆/沉淀, 加酶活性 阻断剂(氟化钠)或抗氧剂(VC), 煮沸
第二节体内样品分析的前处理前处理(分离，浓集，改性)为药物的测定提供条件前处理是体内药物分析过程中重要且繁复的工作川体内样品预处理的目的常用体内样品预处理方法22025/8/15
2025/8/15 13 第二节 体内样品分析的前处理 1 体内样品预处理的目的 2 常用体内样品预处理方法 前处理(分离, 浓集, 改性) 为药物的测定提供条件 前处理是体内药物分析过程中重要且繁复的工作
一、体内样品前处理的目的血浆蛋白结合物：缀合物1.使待测组分游离使待测药物/代谢物释放测定药物代谢物总浓度2.满足3.改善测定方法分析环境前处理的要求仪器污染，劣化（去蛋白）样品介质组成复杂：分离提高测定灵敏度/选择性待测组分浓度低：浓集化学改性（衍生化）2025/8/152
2025/8/15 14 仪器污染,劣化(去蛋白) 提高测定灵敏度/选择性 化学改性(衍生化) 血浆蛋白结合物;缀合物 使待测药物/代谢物释放 测定药物/代谢物总浓度 1. 使待测 组分游离 2. 满足 测定方法 的要求 3. 改善 分析环境 一、体内样品前处理的目的 样品介质组成复杂: 分离 待测组分浓度低: 浓集 前处理
二、体内样品前处理的方法去除蛋白质法()（二）分离与浓集法(三)缀合物水解法（四）化学衍生化法2025/8/15
2025/8/15 15 二、体内样品前处理的方法 去除蛋白质法 分离与浓集法 缀合物水解法 (一) (二) (三) (四) 化学衍生化法