中南民族大学药学院化学生物学与药学实验教学中心《生药学实验讲义》刘新桥万定荣任永申等编写适用专业：药学专业药物制剂2012年3月-
1 中南民族大学药学院化学生物学与药学实验教学中心 《生药学实验讲义》 刘新桥 万定荣 任永申等 编写 适用专业： 药学专业 药物制剂 2012 年 3 月
目录实验一显微测量和部分药材的性状及显微鉴定3实验二薄层板的铺布和部分生药的性状、显微及理化鉴定12... ..实验三15部分生药的性状、显微及薄层色谱鉴定实验四19部分生药的性状、显微及理化鉴定21实验五单子叶植物类生药性状与显微鉴定22实验六动矿物类药材的性状鉴别与中成药粉末显微鉴定2
2 目 录 实验一 显微测量和部分药材的性状及显微鉴定 . 3 实验二 薄层板的铺布和部分生药的性状、显微及理化鉴定 . 12 实验三 部分生药的性状、显微及薄层色谱鉴定 . 15 实验四 部分生药的性状、显微及理化鉴定 . 19 实验五 单子叶植物类生药性状与显微鉴定 . 21 实验六 动矿物类药材的性状鉴别与中成药粉末显微鉴定 . 22
实验一：显微测量和部分药材的性状及显微鉴定一、实验目的1.掌握显微制片、显微观察方法2.掌握显微测量、药材组织简图和粉末图绘制3.部分药材的性状与显微鉴定二、实验内容1.显微测量：使用标定的显微量尺，在显微镜下测量显微目的物的大小（一般以μⅢ为计量单位），称为显微测量。显微量尺是显微测量标尺的简称，是用来测量显微镜下所观察物体的大小和数目的测量工具。显微量尺由载台量尺和目镜量尺两部分组成，以μm（微米）为长度单位。1.1.载台量尺（Stagemicrometer），又称载台测微尺，是一种刻有标尺的特制载玻片。标尺全长1mm，刻度精确，共刻有10个大格，每一大格又分成10格小格，所以共有100个小格，每一小格的长度是0.01mm，即10μm。有的标尺全长2mm，分为200个小格。标尺的外围有一黑环，便于找到标尺的位置。标尺上用树胶封固一圆形盖玻片加以保护。载台量尺是显微测量的标准，用于校正目镜量尺，并不直接用于测量物体，1.2.目镜量尺，又称目镜测微尺，是一种放置在目镜筒内的标尺，为直径18～20mm的圆形玻璃片，其上刻有各种形式的标尺，有直线式和网格式等。测量长度的标尺为直线式，在圆形玻璃的中央，划有精确的平行刻度线，全长1cm或5mm，等分成100个小格或50个小格（每1个小格长10μm）。测量面积或计算数目的为网格式测微尺。0.01mm102na3
3 实验一 显微测量和部分药材的性状及显微鉴定 一、实验目的 1．掌握显微制片、显微观察方法 2．掌握显微测量、药材组织简图和粉末图绘制 3．部分药材的性状与显微鉴定 二、实验内容 1．显微测量： 使用标定的显微量尺，在显微镜下测量显微目的物的大小（一般以μm 为计量单 位），称为显微测量。显微量尺是显微测量标尺的简称，是用来测量显微镜下所观察 物体的大小和数目的测量工具。显微量尺由载台量尺和目镜量尺两部分组成，以 μm （微米）为长度单位。 1.1.载台量尺（Stage micrometer）,又称载台测微尺，是一种刻有标尺的特制 载玻片。标尺全长 1mm，刻度精确，共刻有 10 个大格，每一大格又分成 10 格小格， 所以共有 100 个小格，每一小格的长度是 0.01mm，即 10μm。有的标尺全长 2mm，分 为 200 个小格。标尺的外围有一黑环，便于找到标尺的位置。标尺上用树胶封固一圆 形盖玻片加以保护。 载台量尺是显微测量的标准，用于校正目镜量尺，并不直接用于测量物体。 1.2.目镜量尺，又称目镜测微尺，是一种放置在目镜筒内的标尺，为直径 18～20mm 的圆形玻璃片，其上刻有各种形式的标尺，有直线式和网格式等。测量长度的标尺为 直线式，在圆形玻璃的中央，划有精确的平行刻度线，全长 1cm 或 5mm，等分成 100 个小格或 50 个小格（每 1 个小格长 10μm）。测量面积或计算数目的为网格式测微尺
使用时，将目镜从镜筒中取出，旋出接目透镜，将目镜量尺放在目镜的光阑上，使有刻度的一面向下，再将接目透镜复位旋上，插回镜筒中，即可进行测量。目镜量尺是用于直接测量物体的，单每小格的长度未知，因此必须用镜台量尺来校正，确定目镜量尺在不同条件下，每一小格的实际长度。1.3.目镜量尺的校正把目镜量尺装入目镜筒内后，将载台量尺安放在载物台上，象通常观察标本一样把有标尺的部位移到视野中央，调整焦距，看清楚标尺上的刻度线；转动目镜，使载台量尺和目镜量尺相互平行：适当移动载台量尺，使两量尺一端的刻度线相互重送在一起，再找出两量尺在另一端的重选刻度线，分别记下两个量尺在两条重选线之间的小格数，按下列公式计算：载台量尺的格数×10m目镜量尺每1小格的实际长度=目镜里尺的格类数例1：目镜10×，物镜10×，测得载台量尺100小格与目镜量尺99小格完全重迭。则：100X10目镜量尺每1小格的实际长度=~10.1μm (10)99例2：目镜10×，物镜40×，测得镜台量尺25小格与目镜量尺100小格完全重迭。25x10~2.5μm则：目镜量尺每1小格长度=-100测得的数据，只要不更换显微镜或镜头，就能长期使用，一般记录在卡片上，以便查用。1.4.微细物体的测量取下载台量尺，换上欲测标本片，观察，用目镜量尺测量物体所占的小格数，乘以目镜量尺每一小格的已测好的实际长度，即得。例如：在10×40镜下测得山药针晶束长40小格，每一小格长度为2.5μm，针晶束长度是：2.5×40=100μm由于观察得误差，如果计算结果有小数，可四舍五入。1.5.使用显微量尺得注意事项（1）显微量尺的校正和使用操作是，必须先低倍镜，再高倍镜。（2）两个量尺重送线之间的小格数应尽量多一些，因数目越少，误差越大。（3）更换显微镜或镜头后，必须重新校正和换算目镜量尺每小格长度。（4）物体测量通常使用高倍镜，测量长形物体如毛茸、纤维等，也可用低倍镜。4
4 使用时，将目镜从镜筒中取出，旋出接目透镜，将目镜量尺放在目镜的光阑上， 使有刻度的一面向下，再将接目透镜复位旋上，插回镜筒中，即可进行测量。 目镜量尺是用于直接测量物体的，单每小格的长度未知，因此必须用镜台量尺来 校正，确定目镜量尺在不同条件下，每一小格的实际长度。 1.3.目镜量尺的校正 把目镜量尺装入目镜筒内后，将载台量尺安放在载物台上，象通常观察标本一样， 把有标尺的部位移到视野中央，调整焦距，看清楚标尺上的刻度线；转动目镜，使载 台量尺和目镜量尺相互平行；适当移动载台量尺，使两量尺一端的刻度线相互重迭在 一起，再找出两量尺在另一端的重迭刻度线，分别记下两个量尺在两条重迭线之间的 小格数，按下列公式计算： 目镜量尺每 1 小格的实际长度= 例 1：目镜 10×，物镜 10×，测得载台量尺 100 小格与目镜量尺 99 小格完全重 迭。则： 目镜量尺每 1 小格的实际长度＝ ≈10.1μm（10） 例 2：目镜 10×，物镜 40×，测得镜台量尺 25 小格与目镜量尺 100 小格完全重迭。 则： 目镜量尺每 1 小格长度＝ ≈2.5μm 测得的数据，只要不更换显微镜或镜头，就能长期使用，一般记录在卡片上， 以便查用。 1.4.微细物体的测量 取下载台量尺，换上欲测标本片，观察，用目镜量尺测量物体所占的小格数，乘 以目镜量尺每一小格的已测好的实际长度，即得。 例如：在 10×40 镜下测得山药针晶束长 40 小格，每一小格长度为 2.5μm，针 晶束长度是：2.5×40＝100μm 由于观察得误差，如果计算结果有小数，可四舍五入。 1.5.使用显微量尺得注意事项 （1）显微量尺的校正和使用操作是，必须先低倍镜，再高倍镜。 （2）两个量尺重迭线之间的小格数应尽量多一些，因数目越少，误差越大。 （3）更换显微镜或镜头后，必须重新校正和换算目镜量尺每小格长度。 （4）物体测量通常使用高倍镜，测量长形物体如毛茸、纤维等，也可用低倍镜
2.显微切片与制片：2.1.徒手切片制片法（1）取材根类，一般取主根中部，长2～3cm，直径1～1.5cm，较粗的根或根茎可用分割法，用刀割取所需部分；叶类以及鳞茎和完整的鳞叶，一般取主脉中部带有少量两侧叶肉部分；花类，一般取各部分分别制片：果实种子类，较小型的取完整者，大型果实也可用分割法取所需部位。所取样品均需有代表性，应无畸形、虫蛀、霉变或其他污染等。（2）软化选好样品后，新鲜或软硬适中者可直接切片，干燥材料应经软化处理后再进行切片，常用的软化方法有以下几种：①冷水或温水浸泡：适用于一般样品。②低浓度乙醇（30%50%）浸泡：适用于含黏液质和菊糖等水溶性物质的样品。③水煮法：适用于木材等坚硬的样品。方法是将干燥样品投入冷水中煮沸至沉入水底，即示细胞内空气已被除尽，取出样品，放入甘油一乙醇（1：1）的软化液中软化，至软硬适中。④水蒸气软化法：适用于作显微化学用的样品。方法：是把样品放干燥器隔板上，再放入含5%苯酚的水适量，旋紧干燥器，一般经12-24小时，即可吸湿软化，或在于燥器中放温水不超过隔板，隔板上铺湿纱布一层，放上干燥样品，加盖密封，45℃恒温，至样品软硬适中。（3）徒手切片按常规法：右手持徒手切片，则以左手姆指和食指夹持软化好的样品材料，用中指托着，使材料略高出食指和拇指，左手肘关节靠桌沿，以免切片时晃动，右手执切片刀片，与材料的切面保持平行（刀片或材料用蒸馏水或选择的润湿剂润滑，更便于切)，刀口向内，从左至右移动，一次切下，所得薄片约在10～20um之内。材料和刀刃经常润湿反复切削，将切削的薄片用毛笔沾水(或经选择的润湿剂，如稀甘油等）轻轻顺刀口方向拂下，放入盛有润湿剂的培养血中，再选择薄而完整的切片标本，用稀甘油等封藏观察，必要时还应作水合氯醛液透化加热，稀甘油封片观察。对较小的材料或叶片，可用小通草、胡萝下及质厚的叶片等作夹持材料，即将小通草等夹持材料纵部一条缝，把材料放下夹上，注意材料要放正，使切削时与刀片成一平行面。切削时连同小通草等夹持材料一起切下，放入盛有润湿剂的培养血中，选择时除去夹持材料，按一般制片法及特殊处理制片即得。5
5 2．显微切片与制片： 2.1．徒手切片制片法 （1）取材 根类，一般取主根中部，长 2～3cm，直径 1～1.5cm，较粗的根或 根茎可用分割法，用刀割取所需部分；叶类以及鳞茎和完整的鳞叶，一般取主脉中部 带有少量两侧叶肉部分；花类，一般取各部分分别制片；果实种子类，较小型的取完 整者，大型果实也可用分割法取所需部位。 所取样品均需有代表性，应无畸形、虫蛀、霉变或其他污染等。 （2）软化 选好样品后，新鲜或软硬适中者可直接切片，干燥材料应经软化处 理后再进行切片，常用的软化方法有以下几种： ①冷水或温水浸泡：适用于一般样品。 ②低浓度乙醇（30％～50％）浸泡：适用于含黏液质和菊糖等水溶性物质的样品。 ③水煮法：适用于木材等坚硬的样品。方法是将干燥样品投入冷水中煮沸至沉入 水底，即示细胞内空气已被除尽，取出样品，放入甘油－乙醇（1：1）的软化液中软 化，至软硬适中。 ④水蒸气软化法：适用于作显微化学用的样品。 方法：是把样品放干燥器隔板上，再放入含 5％苯酚的水适量，旋紧干燥器，一 般经 12-24 小时，即可吸湿软化，或在干燥器中放温水不超过隔板，隔板上铺湿纱布 一层，放上干燥样品，加盖密封，45℃恒温，至样品软硬适中。 （3）徒手切片 按常规法：右手持徒手切片，则以左手姆指和食指夹持软化好 的样品材料，用中指托着，使材料略高出食指和拇指，左手肘关节靠桌沿，以免切片 时晃动，右手执切片刀片，与材料的切面保持平行(刀片或材料用蒸馏水或选择的润 湿剂润滑，更便于切)，刀口向内，从左至右移动，一次切下，所得薄片约在 10～20 μm 之内。材料和刀刃经常润湿反复切削，将切削的薄片用毛笔沾水(或经选择的润 湿剂，如稀甘油等)轻轻顺刀口方向拂下，放入盛有润湿剂的培养皿中，再选择薄而 完整的切片标本，用稀甘油等封藏观察，必要时还应作水合氯醛液透化加热，稀甘油 封片观察。 对较小的材料或叶片，可用小通草、胡萝卜及质厚的叶片等作夹持材料，即将小 通草等夹持材料纵剖一条缝，把材料放下夹上，注意材料要放正，使切削时与刀片成 一平行面。切削时连同小通草等夹持材料一起切下，放入盛有润湿剂的培养皿中，选 择时除去夹持材料，按一般制片法及特殊处理制片即得