4.步骤 3)反应体系设置 Parameter Concentration Template 10 attomoles(~1 X 106 molecules) PH 8.4 (10mM Tris-Hcl) dNTPs 200 u M(each one) Gelatin 100 g/ml (optional) Primers 0.5 M(each one);(0.1-1.Ou M) Mg2+oncentration >0.5mM<10mM Enzyme 1 unit Total volume 25-100u1
4. 步骤 3)反应体系设置 Parameter Concentration Template pH dNTPs Gelatin Primers Mg2+ oncentration Enzyme Total volume 10 attomoles(~1×106 molecules) 8.4(10mM Tris-Hcl) 200 μ M(each one) 100 g/ml (optional) 0.5 μ M(each one);(0.1—1.0μ M) >0.5mM< 10mM 1 unit 25—100μ l
4.步骤 4)反应条件设置 变性 90-97℃/30-60s 退火 45-55℃/30-60s 延伸 72℃左右 循环次数 25-30 不超过35 94℃,2'→940℃,1’→42℃,1’→720℃,2’→720℃,10 |----30cycl1es---|
4. 步骤 4)反应条件设置 变性 90-97℃ / 30-60s 退火 45-55℃/3 0-60s 延伸 72℃左右 循环次数 25-30 不超过35 940C,2’940C,1’420C,1’720C,2’720C,10’ |-------30 cycles-------|
DNA模板 DNA引物 dNTP TaqDNA聚合 酶
DNA模板 DNA引物 dNTP TaqDNA聚合 酶
5)扩增产物的检测 电泳槽 核酸或蛋白质的电泳定性分析时的凝胶支架
电泳槽 核酸或蛋白质的电泳定性分析时的凝胶支架 5)扩增产物的检测
88 芯 655G 电泳时提供电压和电流
电泳时提供电压和电流