第二章基因工程的酶学基础 DNA duplex restriction enzyme 肉肉可可 sticky onds
第二章 基因工程的酶学基础
内 容 一、概述 二、限制性内切核酸酶 三、DNA连接酶 四、其他工具酶
一、概述 二、限制性内切核酸酶 三、DNA连接酶 四、其他工具酶 内 容
一、概述 工具酶：在生物技术中常用的各种工具酶系 指能用于DNA和RNA分子的切割、连接、聚合、 反转录等有关的各种酶系统称为工具酶
一、概述 工具酶：在生物技术中常用的各种工具酶系 指能用于DNA和RNA分子的切割、连接、聚合、 反转录等有关的各种酶系统称为工具酶
常用的工具酶 工具酶名称 主要 功 能 限制性内切核酸酶 在DNA分子内部的特异性的 restriction endonucleases 碱基序列内部进行切割 DNA连接酶 将两条以上的线性DNA分子或片段 DNA ligase 催化形成磷酸二酯键连接成一个整体 DNA聚合酶I 通过向3'端逐一增加核苷酸以填补双链DNA分子上的单链 DNA polymerase I 裂口，即5→3DNA聚合酶活性与3'→5'及5→3'外切酶活性 多核苷酸激酶 催化将把一个磷酸分子加到多核苷酸链的 DNA polymerase kinease 5OH末端上 (接下表格)
常用的工具酶 工 具 酶 名 称 主 要 功 能 限制性内切核酸酶 在DNA分子内部的特异性的 restriction endonucleases 碱基序列内部进行切割 DNA连接酶 将两条以上的线性DNA分子或片段 DNA ligase 催化形成磷酸二酯键连接成一个整体 DNA聚合酶I 通过向3’端逐一增加核苷酸以填补双链DNA分子上的单链 DNA polymerase I 裂口，即5’→3’DNA聚合酶活性与3’→5’及5’→3’外切酶活性 多核苷酸激酶 催化将把一个磷酸分子加到多核苷酸链的 DNA polymerase kinease 5’-OH末端上 (接下表格)
常用的工具酶 工具酶名称 主要 功 能 反转录酶 以RNA分子为模板合成互补的cDNA链 reverse transcriptase DNA末端转移酶 将同聚物尾巴加到线性双链或单链DNA分子的3'OH DNA terminal transferase 末端或DNA的3'末端标记dNTP 碱性磷酸酶 去除DNA,RNA,dNTP的5磷酸基团 BAP orCIAP 核酸外切酶川 降解DNA3'OH末端的核苷酸残基 exonuclease III 降解酶S1 降解单链DNA或RNA,产生带5磷酸的单核苷酸或 nuclease S1 寡聚核苷酸，同时也可切割双链核酸分子的单链
常用的工具酶 工 具 酶 名 称 主 要 功 能 反转录酶 以RNA分子为模板合成互补的cDNA链 reverse transcriptase DNA末端转移酶 将同聚物尾巴加到线性双链 或单链DNA分子的 3’-OH DNA terminal transferase 末端或DNA的3’-末端标记dNTP 碱性磷酸酶 去除DNA,RNA,dNTP的5’磷酸基团 BAP orCIAP 核酸外切酶III 降解DNA3’-OH末端的核苷酸残基 exonuclease III 降解酶S1 降解单链DNA或RNA,产生带5’磷酸的单核苷酸或 nuclease S1 寡聚核苷酸，同时也可切割双链核酸分子的单链