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PCR的基本原理 • PCR反应条件 • PCR过程 • PCR的特点 95℃ 50℃ 72℃ Taq Taq Taq Taq
■■■■■■下 72℃ 小a 第2轮结束 P乃■■ 小
PCR的基本原理 • PCR反应条件 • PCR过程 • PCR的特点 72℃ 第2轮结束
重复6轮后 第3轮扩增 -5国è)4 理想拷贝数=2加 □ 第4轮增第5轮扩增 n循环次数 实际拷贝数=(1+x) X平均效率，约为0.85 n循环次数
• PCR反应条件 • PCR过程 • PCR的特点 重复30轮后 2 30=1,073,741,824 第模板DNA 1轮扩增 第2轮扩增 第3轮扩增 第4轮扩增第5轮扩增 第6轮扩增 理想拷贝数=2n n 循环次数 实际拷贝数=(1+x)n X 平均效率,约为0.85 n 循环次数
一、PCR检测 3.特点 3.1高度的敏感性 PCR产物的生成是以指数方式增加的，即使 按75%的扩增效率计算，单拷贝基因经25次循环 后，其基因拷贝数也在100万以上，即可将极微量 (pg级)DNA扩增到紫外光下可见的水平（μg级）。 3.2高度的特异性 PCR扩增的特异性在很大程度上依赖于引物 与模板的互补程度，即引物与模板结合的正确性
一、PCR检测 3. 特点 3.1高度的敏感性 PCR产物的生成是以指数方式增加的，即使 按75%的扩增效率计算，单拷贝基因经25次循环 后，其基因拷贝数也在100万以上，即可将极微量 (pg级)DNA扩增到紫外光下可见的水平(g级)。 3.2高度的特异性 PCR扩增的特异性在很大程度上依赖于引物 与模板的互补程度，即引物与模板结合的正确性
3.3操作简便、快速 4.4适用样品广泛 含微量(pg、ng)目的DNA或RNA的样品即可 用作反应的起始材料
3.3 操作简便、快速 4.4 适用样品广泛 含微量(pg、ng)目的DNA或RNA的样品即可 用作反应的起始材料