3.在洋葱内表皮用刀片划出一个约0.25c2的正方形(在使用刀片时 注意安全),用镊子撕取洋葱内表皮。 4.将内表皮置于载玻片的碘液中,并使之铺开。 5从一一训开始冯悔盖上盖破片,不能有气狗立生 6。然后用吸水纸吸取多余的染液,使洋葱表皮细胞均匀染色 7.显微镜下观察。 (三)蛔虫肠上皮细胞 蛔虫肠上皮切片或蛔虫横切片,先用低倍镜找到物像后,再换高倍镜进 行观察,可见蛔虫肠管由一层排列整齐的柱状上皮细胞构成,每个细胞可见 到由细胞膜、细胞质、细胞核三部分构成,核位于基底部。 (四)蟾蜍血球 取蟾蜍血球涂片,置低倍镜下(注意将玻片有染料的面朝上),可见视 野内有许多椭园形细胞,换高倍镜,转动细调节器,直至细胞清晰为止,可 见细胞外一层界膜即细胞膜,位于细胞中央,染成兰紫色的即细胞核。细胞 核与细胞膜之间,染成淡黄色的部分即细胞质。 四、生物绘图方法 绘图是生物实验报告的一种重要形式,其基本要求如下: (一)准备好3铅笔、橡皮、刀、尺子及绘图纸,将绘图纸放在观察物 的有边、纸下不要垫书或纸张。 (二)绘图时,特别注意观察物的形状、各部分的位置、比例和毗邻关系。 (三)图的位置、大小要适宜,图占报告纸左上方2/3的面积,并考虑注 字的位置。 (四)观察清楚后,选择典型的细胞或组织,左眼看显微镜,右眼配合 右手,先用铅笔在纸上轻轻描出轮廓,使形状正确,然后再用清晰的线条绘 出,线条粗细要均匀不要重复。 (五)用圆小点表可 明暗和立体感,点的大小要均 不能涂阴景 (六)图绘好后,要在图的右侧注明各部分结构名称 ,引线要直而平行 长短适度,各引线不能交叉,各线右端上下对齐,注字要用正楷,不能潦草, 要自左向右写。 (七)每一个图下面要注明图的名称。 (八)绘图纸上所有注字(包括姓名、实验日期、题目等)均用铅笔书写 不能用其他笔写 五、作业与思考 1、绘人口腔粘膜上皮细胞图。 2、绘人洋葱上皮细胞图。 (李永芳》 6
6 3.在洋葱内表皮用刀片划出一个约 0.25cm2 的正方形(在使用刀片时 注意安全),用镊子撕取洋葱内表皮。 4.将内表皮置于载玻片的碘液中,并使之铺开。 5.从一侧开始慢慢盖上盖玻片,不能有气泡产生。 6.然后用吸水纸吸取多余的染液,使洋葱表皮细胞均匀染色。 7.显微镜下观察。 (三)蛔虫肠上皮细胞 蛔虫肠上皮切片或蛔虫横切片,先用低倍镜找到物像后,再换高倍镜进 行观察,可见蛔虫肠管由一层排列整齐的柱状上皮细胞构成,每个细胞可见 到由细胞膜、细胞质、细胞核三部分构成,核位于基底部。 (四)蟾蜍血球 取蟾蜍血球涂片,置低倍镜下(注意将玻片有染料的面朝上),可见视 野内有许多椭园形细胞,换高倍镜,转动细调节器,直至细胞清晰为止,可 见细胞外一层界膜即细胞膜,位于细胞中央,染成兰紫色的即细胞核。细胞 核与细胞膜之间,染成淡黄色的部分即细胞质。 四、生物绘图方法 绘图是生物实验报告的一种重要形式,其基本要求如下: (一)准备好 3H 铅笔、橡皮、刀、尺子及绘图纸,将绘图纸放在观察物 的有边、纸下不要垫书或纸张。 (二)绘图时,特别注意观察物的形状、各部分的位置、比例和毗邻关系。 (三)图的位置、大小要适宜,图占报告纸左上方 2/3 的面积,并考虑注 字的位置。 (四)观察清楚后,选择典型的细胞或组织,左眼看显微镜,右眼配合 右手,先用铅笔在纸上轻轻描出轮廓,使形状正确,然后再用清晰的线条绘 出,线条粗细要均匀不要重复。 (五)用圆小点表示明暗和立体感,点的大小要均匀,不能涂阴影。 (六)图绘好后,要在图的右侧注明各部分结构名称,引线要直而平行, 长短适度,各引线不能交叉,各线右端上下对齐,注字要用正楷,不能潦草, 要自左向右写。 (七)每一个图下面要注明图的名称。 (八)绘图纸上所有注字(包括姓名、实验日期、题目等)均用铅笔书写, 不能用其他笔写。 五、作业与思考 1、绘人口腔粘膜上皮细胞图。 2、绘人洋葱上皮细胞图。 (李永芳)
实验三细胞器的观察 一、实验目的 观察除了实验二五以外的其它细胞器在光学显微镜和电子显微镜下 的基本形态结构。 二、实验内容 (一)三种细胞器的光镜切片 1、高尔基复合体(Golgi Complex)) 用镀银法染色的豚鼠脊神经节光镜切片:神经细胞因合成运输大量的蛋 白质而含有发达的内质网和高尔基复合体,在低倍镜下观察,神经节的假单 极细胞体被神经束分隔成群。神经细胞的胞体呈圆形或椭圆形。转换高倍镜 观察,细胞中央不着色的圆形区为细胞核。在核的周围有黑褐色颗粒状或呈 不规则的条索状结构即为高尔基复合体(见图2-4) -离尔基体 图2-4神经节细胞(示高尔基复合体) 2、尼氏小体(Niss1's Body)) 甲苯胺兰染色的牛脊髓涂片,尼氏小体即光镜下的粗面内质网。在低倍 镜卡观察,染成蓝色的大三角形、星形细胞就是脊髓前角神经细胞,染色较 深的小细胞为神经胶质细胞。转换高倍镜观察,可见脊髓前角神经细胞的细 胞质中许多蓝色颗粒或网状结构即为尼氏小体(见图2-5)。 ·0 图2-5脊髓前角神经细胞的尼氏小体 3、中心体(Centrosome)) 铁苏木素染色的马蛔虫子宫切片,在低倍镜下观察可见许多受精卵细 >
7 实验三 细胞器的观察 一、实验目的 观察除了实验二~五以外的其它细胞器在光学显微镜和电子显微镜下 的基本形态结构。 二、实验内容 (一)三种细胞器的光镜切片 1、高尔基复合体(Golgi Complex) 用镀银法染色的豚鼠脊神经节光镜切片:神经细胞因合成运输大量的蛋 白质而含有发达的内质网和高尔基复合体,在低倍镜下观察,神经节的假单 极细胞体被神经束分隔成群。神经细胞的胞体呈圆形或椭圆形。转换高倍镜 观察,细胞中央不着色的圆形区为细胞核。在核的周围有黑褐色颗粒状或呈 不规则的条索状结构即为高尔基复合体(见图 2-4)。 图 2-4 神经节细胞(示高尔基复合体) 2、尼氏小体(Nissl’s Body) 甲苯胺兰染色的牛脊髓涂片,尼氏小体即光镜下的粗面内质网。在低倍 镜卡观察,染成蓝色的大三角形、星形细胞就是脊髓前角神经细胞,染色较 深的小细胞为神经胶质细胞。转换高倍镜观察,可见脊髓前角神经细胞的细 胞质中许多蓝色颗粒或网状结构即为尼氏小体(见图 2-5)。 图 2-5 脊髓前角神经细胞的尼氏小体 3、中心体(Centrosome) 铁苏木素染色的马蛔虫子宫切片,在低倍镜下观察可见许多受精卵细
胞,细胞的外面有卵壳,细胞与卵壳之间的腔叫卵壳腔。在某些卵细胞内, 于核附近有圆形的小粒 一中心粒,它与周围致密的细胞质一 一中心球,组 成中心体。转换高倍镜观察,可见中心体的外围还有星状的放射细丝即星体 (见图2-6)。 染色体中心体 图2-6马细虫受精卵细胞、分裂中期(示中心体) (二)六种细胞器的电镜照片 1、高尔基复合体(Golgi Complex) 人体胃粘膜细胞高尔基复合体电镜照片:细胞质中有散在的高尔基复合 体,其结构要由三部分组成:扁平囊、大囊泡和小囊泡,它们共同构成紧密 重叠的囊泡结构。扁平囊约3~一8层,它们平行排列,路弯曲成弓形。凸出 的一侧为形成面,可见许多小囊泡,凹入的一侧为成熟面,可见扁平囊末端 呈球形膨大,在分泌细胞中膨大部分不断脱离扁平囊,形成分泌泡。 2、内质网(Endoplasmic Reticulum) 人胃壁细胞、恒河猴脊箭前角运动神经细胞粗面内质网电镜照片:粗面 内质网在分泌蛋白质的细胞中较发达,在细胞核周围可见有较密集的膜层结 构即为粗面内质网,它们大都呈片状排列,粗面内质网可与细胞核膜相通连。 在粗面内质网的膜外表面附着许多小颗粒,即核糖体。 人胃粘膜盐酸细胞、小鼠睾丸间质细胞滑面内质网电镜照片:盐酸细胞 分泌盐酸,细胞中密集的圆泡,无核糖体附者即滑面内质网,参加盐酸的合 成。小鼠睾丸间质细胞中含有丰富的分支管状滑面内质网,合成固醇类的雄 激素。 3、中心粒(Centriole) 白血病细胞的中心粒电镜照片:中心粒是相互垂直的两个短筒状小体 从横切面看,每个短简由9组三联体微管组成。 4、容醢体(LVs0some) 小鼠肝细胞、人胃癌细胞溶酶体电镜照片:溶酶体为一层单位膜包围的 囊状结构。溶酶体呈球形,质地均匀,吞噬性溶衡体依结合物不同而呈不同 形态,溶酶体主要含酸性水解酶。 5、核糖体(Ribosome)
8 胞,细胞的外面有卵壳,细胞与卵壳之间的腔叫卵壳腔。在某些卵细胞内, 于核附近有圆形的小粒——中心粒,它与周围致密的细胞质——中心球,组 成中心体。转换高倍镜观察,可见中心体的外围还有星状的放射细丝即星体 (见图 2-6)。 染色体中心体 图 2-6 马蛔虫受精卵细胞、分裂中期(示中心体) (二)六种细胞器的电镜照片 1、高尔基复合体(Golgi Complex) 人体胃粘膜细胞高尔基复合体电镜照片:细胞质中有散在的高尔基复合 体,其结构要由三部分组成:扁平囊、大囊泡和小囊泡,它们共同构成紧密 重叠的囊泡结构。扁平囊约 3~8 层,它们平行排列,略弯曲成弓形。凸出 的一侧为形成面,可见许多小囊泡,凹入的一侧为成熟面,可见扁平囊末端 呈球形膨大,在分泌细胞中膨大部分不断脱离扁平囊,形成分泌泡。 2、内质网(Endoplasmic Reticulum) 人胃壁细胞、恒河猴脊髓前角运动神经细胞粗面内质网电镜照片:粗面 内质网在分泌蛋白质的细胞中较发达,在细胞核周围可见有较密集的膜层结 构即为粗面内质网,它们大都呈片状排列,粗面内质网可与细胞核膜相通连。 在粗面内质网的膜外表面附着许多小颗粒,即核糖体。 人胃粘膜盐酸细胞、小鼠睾丸间质细胞滑面内质网电镜照片:盐酸细胞 分泌盐酸,细胞中密集的圆泡,无核糖体附着即滑面内质网,参加盐酸的合 成。小鼠睾丸间质细胞中含有丰富的分支管状滑面内质网,合成固醇类的雄 激素。 3、中心粒(Centriole) 白血病细胞的中心粒电镜照片:中心粒是相互垂直的两个短筒状小体, 从横切面看,每个短简由 9 组三联体微管组成。 4、溶酶体(Lysosome) 小鼠肝细胞、人胃癌细胞溶酶体电镜照片:溶酶体为一层单位膜包围的 囊状结构。溶酶体呈球形,质地均匀,吞噬性溶酶体依结合物不同而呈不同 形态,溶酶体主要含酸性水解酶。 5、核糖体(Ribosome)
小鼠肾细胞核糖体电镜照片:核糖体是由核糖核酸和蛋白质构成的大小 亚基组成的椭圆形颗粒,附着于内质网上的称附着核糖体,此外还有散在于 细胞质中的游离核糖体,而多个核糖体由mRNA串连在一起叫多聚核糖体。 6、细跑核(Cell nucleus) 豚鼠肝细胞核、人胃癌细胞核电镜照片:可见核膜由双层单位膜构成。 内外核膜相距一定的距离结合形成核孔。核膜外层也附着核糖体并与内质网 相通。 核中的海绵状球形结构就是核仁,它由纤维和颗拉构成 在核膜内面和核仁四周,着色较深的为异染色质,其余着色较浅的是常 染色质。 (三)观察恒河猴脊髓前角运动细胞的电镜照片,总结细胞的超微结构: 照片中是一个多角形的脊髓前角运动细胞,细胞表面以非常细的线条与 周围分界,就是细胞膜。中央有圆形的细胞核,核膜密布核孔,核膜内侧少 量着色深而致密的是异染色质,色浅的是常染色质。核中央海绵状的一团深 色结构是核仁。细胞膜与核膜之间为细胞质。其中有许多膜性结构形成扁平 囊状或管泡状,密集成排的膜上附有颗粒,这就是粗面内质网。分散于细胞 质中内质网间的许多圆形或棒状膜结构是线粒体。在核的四周可见小泡,扁 平囊等集合形成的高尔基复合体。在细胞质中还可见一些不规则形的黑色致 密结构是脂褐质,细胞质基质中分散存在纤细的微丝和微管是细胞骨架成 税 四、作业与思考 1、真核细胞的亚显微结构是怎样的? 2、光镜下与电镜下的细胞结构有什么不同? (李永芳宗传龙)
9 小鼠肾细胞核糖体电镜照片:核糖体是由核糖核酸和蛋白质构成的大小 亚基组成的椭圆形颗粒,附着于内质网上的称附着核糖体,此外还有散在于 细胞质中的游离核糖体,而多个核糖体由 mRNA 串连在一起叫多聚核糖体。 6、细胞核(Cell Nucleus) 豚鼠肝细胞核、人胃癌细胞核电镜照片:可见核膜由双层单位膜构成。 内外核膜相距一定的距离结合形成核孔。核膜外层也附着核糖体并与内质网 相通。 核中的海绵状球形结构就是核仁,它由纤维和颗粒构成。 在核膜内面和核仁四周,着色较深的为异染色质,其余着色较浅的是常 染色质。 (三)观察恒河猴脊髓前角运动细胞的电镜照片,总结细胞的超微结构。 照片中是一个多角形的脊髓前角运动细胞,细胞表面以非常细的线条与 周围分界,就是细胞膜。中央有圆形的细胞核,核膜密布核孔,核膜内侧少 量着色深而致密的是异染色质,色浅的是常染色质。核中央海绵状的一团深 色结构是核仁。细胞膜与核膜之间为细胞质。其中有许多膜性结构形成扁平 囊状或管泡状,密集成排的膜上附有颗粒,这就是粗面内质网。分散于细胞 质中内质网间的许多圆形或棒状膜结构是线粒体。在核的四周可见小泡,扁 平囊等集合形成的高尔基复合体。在细胞质中还可见一些不规则形的黑色致 密结构是脂褐质,细胞质基质中分散存在纤细的微丝和微管是细胞骨架成 份。 四、作业与思考 1、真核细胞的亚显微结构是怎样的? 2、光镜下与电镜下的细胞结构有什么不同? (李永芳 宗传龙)
实验四细胞膜的通透性和细胞的吞噬活动 一、目的和要求 通过对细胞膜吞噬活动和通透性进行观察,掌握细胞膜的生理特性, 二、材料和用品 1%鸡红细胞悬液、10%兔红细胞悬液、6%淀粉牛肉汤(含胎盘兰)、 0.17mMol氯化钠、0.17mMol氯化铵、0.17mMol硝酸钠、0.12mMol硫酸钠 0.12mMol草酸铵、0.17mMol醋酸铵、0.32mMol葡萄糖、0.32mMol乙醇 0.32mMo丙醇、0.32mMol丙三醇、石蜡屑、生理盐水。 手术剪刀、手术探针、蛙板、大头针、光学显微镜、注射器、载玻片、 盖玻片、镊子、吸管、试管、试管架、移液管(5ml、1ml)、橡皮吸球、棉 球、吸水纸、记号笔。 蟾蜍、豚鼠、家兔。 三、内容和方法 细胞膜是细胞质和外界相隔的一层薄膜,它限定了细胞的范围,使细胞 内的物质和外界环境之间保持必要的差别。细胞膜在细胞的生理活动中起着 十分重要的作用,尤其在调节细胞内外物质运输和信号传递等方面起着非常 重要的作用。 (一)吞噬运动 1、实验原理:吞噬作用是胞吞作用的一种形式,在高等动物中典型的 吞噬运动常见于巨噬细胞对外来异物的吞噬。在本次实验中,先将含染料的 淀粉牛肉汤(外来异物)注入实验动物的腹腔,刺激动物机体产生大量的巨 噬细胞,并吞噬含染料的淀粉牛肉汤,使巨噬细胞者上染料的颜色,再向动 物腹腔注入鸡红细胞,诱导动物腹腔中的巨噬细胞来吞噬鸡红细胞,并用光 学显微镜观察这一过程。 2、实哈步隆: ①在实验的前一天,由教师向豚鼠腹腔注射6%淀粉牛肉汤(含4%的 胎盼兰)1ml,以刺激实验动物的腹腔产生较多的巨噬细胞,注射时一定要 将注射物注入动物的腹腔内,并注意勿刺伤动物的内脏器官。 ②实验时,每组取一只经上述处理过的豚鼠,向其腹腔中注射1ml1% 鸡红细胞悬液。 ③30分钟后,用颈椎脱白法将动物处死,剪开腹腔,用少量生理盐水 冲洗数次,将豚鼠腹腔液吸入一个小试管中。 ④海人取一干净载玻片,滴一滴动物腹腔液于玻片上,盖上盖玻片在显
10 实验四 细胞膜的通透性和细胞的吞噬活动 一、目的和要求 通过对细胞膜吞噬活动和通透性进行观察,掌握细胞膜的生理特性。 二、材料和用品 1%鸡红细胞悬液、10%兔红细胞悬液、6%淀粉牛肉汤(含胎盘兰)、 0.17mMol 氯化钠、0.17mMol 氯化铵、0.17mMol 硝酸钠、0.12mMol 硫酸钠、 0.12mMol 草酸铵、0.17mMol 醋酸铵、0.32mMol 葡萄糖、0.32mMol 乙醇、 0.32mMol 丙醇、0.32mMol 丙三醇、石蜡屑、生理盐水。 手术剪刀、手术探针、蛙板、大头针、光学显微镜、注射器、载玻片、 盖玻片、镊子、吸管、试管、试管架、移液管(5ml、1ml)、橡皮吸球、棉 球、吸水纸、记号笔。 蟾蜍、豚鼠、家兔。 三、内容和方法 细胞膜是细胞质和外界相隔的一层薄膜,它限定了细胞的范围,使细胞 内的物质和外界环境之间保持必要的差别。细胞膜在细胞的生理活动中起着 十分重要的作用,尤其在调节细胞内外物质运输和信号传递等方面起着非常 重要的作用。 (一)吞噬运动 1、实验原理:吞噬作用是胞吞作用的一种形式,在高等动物中典型的 吞噬运动常见于巨噬细胞对外来异物的吞噬。在本次实验中,先将含染料的 淀粉牛肉汤(外来异物)注入实验动物的腹腔,剌激动物机体产生大量的巨 噬细胞,并吞噬含染料的淀粉牛肉汤,使巨噬细胞着上染料的颜色,再向动 物腹腔注入鸡红细胞,诱导动物腹腔中的巨噬细胞来吞噬鸡红细胞,并用光 学显微镜观察这一过程。 2、实验步骤: ①在实验的前一天,由教师向豚鼠腹腔注射 6%淀粉牛肉汤(含 4%的 胎朌兰)1ml,以剌激实验动物的腹腔产生较多的巨噬细胞,注射时一定要 将注射物注入动物的腹腔内,并注意勿剌伤动物的内脏器官。 ②实验时,每组取一只经上述处理过的豚鼠,向其腹腔中注射 1ml 1% 鸡红细胞悬液。 ③30 分钟后,用颈椎脱臼法将动物处死,剪开腹腔,用少量生理盐水 冲洗数次,将豚鼠腹腔液吸入一个小试管中。 ④每人取一干净载玻片,滴一滴动物腹腔液于玻片上,盖上盖玻片在显