南京发业火学动物生物化学实验实验七动物肝脏DNA的提取动物医学院动物生化教研室
1 实验七 动物肝脏DNA的提取 动物医学院动物生化教研室 动物生物化学实验
一、实验目的了解从动物组织中提取DNA的一般原理；1掌握DNA提取的方法和步骤。2
2 ① 了解从动物组织中提取DNA的一般原理； ② 掌握DNA提取的方法和步骤。 一、实验目的
二、实验原理》利用不同浓度的氯化钠溶液中脱氧核糖核蛋白(DNP)和核糖蛋白(RNP)的溶解度不同,使两者分离。同时利用SDS使DNA与蛋白质分开,利用氯仿-异戊醇去除蛋白质使DNA溶于浓盐溶液中,再用高浓度的乙醇使DNA析出
3 二、实验原理 利用不同浓度的氯化钠溶液中脱氧核糖核蛋白(DNP) 和核糖蛋白(RNP)的溶解度不同,使两者分离。同时利用 SDS使DNA与蛋白质分开,利用氯仿-异戊醇去除蛋白质, 使DNA溶于浓盐溶液中,再用高浓度的乙醇使DNA析出
主要试剂及其作用EDTA螯合Mg2+、Ca2+等金属离子》DNase作用时需要一定的金属离子作辅基》抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用■SDS》抑制核糖核酸酶的作用溶解细胞膜上的脂质与蛋白，溶解膜蛋白而破坏细胞膜与蛋白质结合成为R-0-SO3-·R十-蛋白质的复合物，使蛋白质变性而沉淀下来
4 EDTA 螯合Mg2＋ 、Ca2＋等金属离子 DNase作用时需要一定的金属离子作辅基 抑制脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用 SDS 抑制核糖核酸酶的作用 溶解细胞膜上的脂质与蛋白，溶解膜蛋白而破坏细胞膜 与蛋白质结合成为R-O-SO3-.R＋-蛋白质的复合物，使蛋白质 变性而沉淀下来 主要试剂及其作用
■氯仿》强蛋白质变性剂，使液相与有机相分开>抑制DNA酶的活性■异戊醇》消除抽提过程中出现的泡沫95%乙醇》沉淀DNA
5 氯仿 强蛋白质变性剂，使液相与有机相分开 抑制DNA酶的活性 异戊醇 消除抽提过程中出现的泡沫 95%乙醇 沉淀DNA