分子生物学实验实验四动物组织中RNA的提取
实验四 动物组织中RNA的提取
实验目的了解RNA提取的原理和基本方法
实验目的 了解RNA提取的原理和基本方法
实验原理不同组织总RNA提取的实质就是将细胞裂解,释放出RNA,并通过不同方式去除蛋白、DNA等杂质,最终获得高纯度RNA产物的过程
实验原理 不同组织总RNA提取的实质就是将细胞裂解,释放出 RNA,并通过不同方式去除蛋白、DNA等杂质,最终 获得高纯度RNA产物的过程
提取方法苯酚法,去污剂法,盐酸胍法TRNzol提取法1、总RNA提取试剂,破碎溶解细胞时能保持RNA的完整性。(细胞裂解,释放RNA)2、当加入氯仿,它可抽提酸性苯酚,而酸性苯酚促使RNA进入水相,离心后可形成水相层和有机层,这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离(RNA在水相)。3、异丙醇可沉淀回收水相层中RNA
苯酚法,去污剂法,盐酸胍法 TRNzol提取法 1、总RNA提取试剂,破碎溶解细胞时能保持RNA的完整性。(细胞裂解,释 放RNA) 2、当加入氯仿,它可抽提酸性苯酚,而酸性苯酚促使RNA进入水相,离心后 可形成水相层和有机层,这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离 (RNA在水相)。 3、异丙醇可沉淀回收水相层中RNA。 提取方法
实验药品动物肝脏组织(鸡)TRNzol试剂(异硫氰酸胍+苯酚,8-羟基喹啉,β-巯基乙醇)氯仿异丙醇DEPC(焦碳酸二乙酯,RNA酶抑制剂)乙醇
实验药品 动物肝脏组织(鸡) TRNzol 试剂 (异硫氰酸胍+苯酚, 8-羟基喹啉,β-巯基乙醇) 氯仿 异丙醇 DEPC (焦碳酸二乙酯,RNA酶抑制剂) 乙醇