F南京发业火学动物生物化学实验H22实验二蛋白质的定量测定双缩脲法测定蛋白质浓度动物医学院动物生化教研室
1 实验二 蛋白质的定量测定 -双缩脲法测定蛋白质浓度 动物医学院动物生化教研室 动物生物化学实验
实验目的学习双缩脲法测定蛋白质含量的原理和方法-掌握分光光度仪的使用方法掌握Excel软件制作标准曲线2C
2 ① 学习双缩脲法测定蛋白质含量的原理和方法 ② 掌握分光光度仪的使用方法 ③ 掌握Excel软件制作标准曲线 一、实验目的
二、实验原理蛋白质含量：蛋白质混合物中蛋白质的含量或总蛋白质含量目前常用的方法1）凯氏定氮法紫外吸收法2）分光光度法染料结合法比色法：双缩豚法lFolin-酚法
3 二、实验原理 蛋白质含量：蛋白质混合物中蛋白质的含量或总蛋白质含量 目前常用的方法 1）凯氏定氮法 紫外吸收法 2）分光光度法 染料结合法 比色法：双缩脲法 Folin-酚法
1.分光光度法的基本原理及方法分光光度法是根据物质的吸收光谱及光的吸收定律，对物质进行定性、定量分析的一种方法。根据测定时所用的光源波长的不同，分光光度法可分为可见分光光度法、紫外分光光度法和红外分光光度法等几种。物质对光的吸收具有选择性，若溶液选择性地吸收了某种颜色的光，则溶液呈吸收光的互补光。t紫蓝如果溶液不吸收白色光，则溶液表现为无色透明；如溶液对所有颜色的光全部吸收，则溶液呈黑色。青蓝绿青
4 1. 分光光度法的基本原理及方法 分光光度法是根据物质的吸收光谱及光的吸收定律，对物质进行定性、 定量分析的一种方法。根据测定时所用的光源波长的不同，分光光度法可分 为可见分光光度法、紫外分光光度法和红外分光光度法等几种。 物质对光的吸收具有选择性，若溶液选择性地吸收了 某种颜色的光，则溶液呈吸收光的互补光。 如果溶液不吸收白色光，则溶液表现为无色透明； 如溶液对所有颜色的光全部吸收，则溶液呈黑色
物质呈现的颜色吸收光颜色波长范围（nm)紫黄绿380—435蓝黄435—480橙黄绿蓝480—500绿红紫500—560紫黄绿560—580蓝黄580—595橙绿蓝595—650红蓝绿650—760
5 物质呈现的颜色 吸收光 颜色 波长范围（nm) 黄 绿 紫 380－435 黄 蓝 435－480 橙 黄 绿蓝 480－500 红 紫 绿 500－560 紫 黄绿 560－580 蓝 黄 580－595 绿蓝 橙 595－650 蓝绿 红 650－760