实验四 细菌的分离培养及移植 刘广锦
刘广锦
目的要求1、掌握细菌分离培养的基本要领和常用方法2、使被检材料适当稀释，以求获得独立单在菌落3、复习实验二的染色镜检
一、目的要求 1、掌握细菌分离培养的基本要领和常用方法 2、使被检材料适当稀释，以求获得独立单在菌落 3、复习实验二的染色镜检
实验材料二、·菌种：细菌斜面细菌肉汤·培养基：LB平板、LB斜面、LB液体接种环、酒精灯、玻片、革兰染色试剂，光学显微镜
二、实验材料 菌种: 细菌斜面 细菌肉汤 培养基：LB平板、LB斜面、LB液体 接种环、酒精灯、玻片、革兰染色试剂，光学显微镜
镜检·无菌操作，挑取每个肉汤和斜面中的细菌·革兰染色：1.草酸铵结晶紫染色2min，水洗2.革兰氏碘液媒染2min，水洗·3.95%酒精脱色约30S，水洗·4.沙黄水溶液复染30s，水洗·5.干燥·镜检
镜检 无菌操作，挑取每个肉汤和斜面中的细菌 革兰染色： 1. 草酸铵结晶紫染色 2min，水洗 2. 革兰氏碘液媒染2 min，水洗 3. 95%酒精脱色约30 s，水洗 4. 沙黄水溶液复染30 s，水洗 5. 干燥 镜检
三、细菌的分离培养方法1、纯培养的获得与移植法纯培养：混合的细菌材料，在平板上划线培养（平板划线分离培养法），获得单独的菌落，再移植到其他培养基；移植：纯培养的细菌需要大量繁殖，这个过程就是移植。移植过程：平板/斜面一→肉汤2、芽胞需氧分离培养法80℃水浴15一20分钟，杀死不耐热的细菌繁殖体，再接种至平板，带芽孢的细菌可生长
三、细菌的分离培养方法 1、纯培养的获得与移植法 纯培养：混合的细菌材料，在平板上划线培养（平板划 线分离培养法），获得单独的菌落，再移植到其他培养基； 移植：纯培养的细菌需要大量繁殖，这个过程就是移植。 移植过程：平板/斜面→肉汤 2、芽胞需氧分离培养法： 80℃水浴15－20分钟，杀死不耐热的细菌繁殖体，再接种至平板，带芽 孢的细菌可生长