(c)Sealing nicks Hmm. (d)Branch migration m Holliday junctions (e)Bend d (g) (0 Nicking Nicking Cut same strands opposite strands (j)Sealing (h)Sealing nicks nicks 正 MIIII MMHI 产T “亲本链” “重组体
“亲本链” “重组体
三、原核同源重组（E.coli) ·发生在双方DNA的同源区域 部分复制的染色体DNA之间或染色体DNA与外源DNA之间 细菌的转化、结合和转导 1、RecBCD（外切核酸酶V)和Chi位点 ·具有解旋酶（再旋）活性、ATPase活性、核酸外切酶活性、 序列特异性的单链内切酶活性 ·单链内切酶活性和解旋酶活性使DNA产生具有游离末端的单链 一一RecA的作用位点 ·RecBCD有固定切割位点
三、原核同源重组（E.coli） ◘ 发生在双方DNA的同源区域 部分复制的染色体DNA之间或染色体DNA与外源DNA之间 细菌的转化、结合和转导 1、RecBCD（外切核酸酶Ⅴ）和 Chi 位点 ◘ 具有解旋酶（再旋）活性、ATPase活性、核酸外切酶活性、 序列特异性的单链内切酶活性 ◘ 单链内切酶活性和解旋酶活性使DNA产生具有游离末端的单链 －－－RecA的作用位点 ◘ RecBCD有固定切割位点
RecBCD binds a double-strand break 5' ++++++++++++++ 00 ·RecBCD的识别和切割位点 RecBCD unwinds degrades DNA as exonuclease a、RecBCD结合在DNA的平 头末端（产生机制不清楚) ++H+++H+++++什劇 b、外切、解链、移动 RecBCD endonuclease cleaves single strand at ch/ (ATP) c、兔耳状loop结构产生 HHHHHHHHHH （再旋酶活性低于解旋酶活性) RecD dissociates at chi sequence d、RecBCD在Ioop单链区的 口 chi位点3‘方4~6NT处切 断单链（单链内切酶） 米chi位点：GCTGGTGG RecBC continues as helicase 目前发现的重组热点 E.coli含1000个、Euk
3‘ ◘ RecBCD的识别和切割位点 a、 RecBCD结合在DNA的平 头末端（产生机制不清楚） b、 外切、解链、移动 （ATP） c、 兔耳状 loop 结构产生 （再旋酶活性低于解旋酶活性） d、 RecBCD 在 loop 单链区的 chi 位点3‘方4～6NT处切 断单链（单链内切酶） ☀ chi位点：GCTGGTGG 目前发现的重组热点 E.coli 含 1000 个、Euk
RecBCD e、RecBCD切割产生3'单链末端 protein 111 BINDING TO END OF DOUBLE HELIX FOLLOWED BY MOVEMENT MIIIEAIMIIAIAMAAMIIIIIMINI recognition sequence NICKING OF traveling loop RECOGNITION of single-stranded SEQUENCE DNA IIIIITT DISPLACEMENT OF SINGLE-STRANDED WHISKER" RHHHHHO
e、 RecBCD 切割产生3’单链末端
2、RecA蛋白 (1)活性 a、RecA有单、双链DNA结合活性 b、RecA有NTPase活性（底物差异活性） 与单链DNA结合时活性最大-依赖于DNA c、RεcA有启动一个分子的单链侵入到另一双螺旋分子 的能力，即联会同源DNA (但其靶DNA必须有缺口一一结合DNA)
2、RecA 蛋白 （1） 活性 a、 RecA 有单、双链 DNA 结合活性 b、 RecA 有 NTPase 活性（底物差异活性） 与单链 DNA 结合时活性最大-依赖于 DNA c、 RecA 有启动一个分子的单链侵入到另一双螺旋分子 的能力，即联会同源 DNA （但其靶 DNA 必须有缺口－－结合DNA）