k3 E+S ES P十E k2 1913年，Michaelis和Menten根据酶和底物反应的“快速平衡” 理论，提出酶促反应的基本原理，推导出底物浓度和反应速度之 间的定量关系式。 米氏方程 P= Vm[S] K+[S] 1925年，Briggs--Haldane从酶被底物饱和的现象出发，按照“稳 态平衡”的设想，对上述方程的推导假设作了修正
1913年，Michaelis和Menten根据酶和底物反应的“快速平衡” 理论，提出酶促反应的基本原理，推导出底物浓度和反应速度之 间的定量关系式。 K S V S v m 米氏方程 max : 1925年，Briggs-Haldane 从酶被底物饱和的现象出发，按照“稳 态平衡”的设想，对上述方程的推导假设作了修正。 E S ES P E k３ k２ k1
S+E ES k2 k3 。P+E 时[EJ-[E [ES] [Es]生成速度：y=k①E,]-[ES[S],[Es]分解速度：=k,[ES]+k[ES] 米 当酶反应体系处于恒态时：V1=V2 即：kIE]-[Es]S]=k[ES]+k[ES] →E-EsS_k+k ES] k 方 令：飞+长=Km 则：Kn[ES]+[ESS=[EIS k 经整理得：[ES]= [E,IS] Km+S可 (1) 推导 由于酶促反应速度由[ES]决定，即V=人[ES] ,所以[ES]=V2 将(2)代入(1)得： y[E,][S] S]() k3 K+[S] K+[S] 当E]=[E]时，v=V。 所以Vm=k[E,] (4) 将(4)代入(3)，则： V= VnasS K+S]
米 氏 方 程 的 推 导 1 2 3 k k k ES Et S ES S 令： Km k k k 1 2 3 将（4）代入（3），则： K S V S v m max S E k1 2 k ES k 3 P E E ES S t ES [ES]生成速度：v k E ESS 1 1 t ，[ES]分解速度：v k ES k ES 2 2 3 即： k E ESS k ES k ES 1 t 2 3 则： K ES ESS S m Et 经整理得： (1) K S E S m t ES 由于酶促反应速度由[ES]决定，即 v k3 ES 3 v k ，所以 ES (2) 将（2）代入（1）得： 3 t m v E S k K S 3 t m k E S K S v (3) 当酶反应体系处于恒态时： 1 2 v v 当 所以 Vm k3 Et (4) [Et]=[ES]时， V m v
米氏常数的意义和应用 ●血是酶在一定条件下的特征物理常数，与酶的种类有关，与酶浓度、 底物浓度无关； ●通过测定血的数值，可对酶进行鉴别，同时可以判断酶的最适底物。 Km则可近似表示酶和底物亲合力，故血愈小，E对S的亲合力愈大；m 愈大，E对S的亲合力愈小。 ●在已知血的情况下，应用米氏方程可计算一定[S]时的W,或一定下的 [S]。(用的倍数表示)
米氏常数的意义和应用 l Km是酶在一定条件下的特征物理常数，与酶的种类有关，与酶浓度、 底物浓度无关； l 通过测定Km的数值，可对酶进行鉴别，同时可以判断酶的最适底物。 Km则可近似表示酶和底物亲合力，故Km愈小，E对S的亲合力愈大；Km 愈大，E对S的亲合力愈小。 l 在已知Km的情况下，应用米氏方程可计算一定[S]时的V，或一定V下的 [S]。（用Km的倍数表示）
2.过氧化氢酶米氏常数的测量的原理
2. 过氧化氢酶米氏常数的测量的原理
(1)直观作图法：以V~S]作图 米氏方程： Vmas V= V [S] Vmax/2 Km+[S] Ka 阿