回川裳掌大学 生命科學婆院 生化与分子生物学系 Sichuan Agricultural University College of Life Science 基础生物化学实验 实验五 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-PAGE) 测定蛋白质的相对分子质量
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目录/Contents 回川黑掌大学 01 实验目的 实验原理 03 实验药品、仪器 04 实验操作步骤 05 结果分析 06 注意事项
目录/Contents 01 实验目的 02 实验原理 03 实验药品、仪器 04 实验操作步骤 05 结果分析 06 注意事项
>1.实验目的 ⑩明回川裳耄大学 Sichuan Agricultural Universit ●学习SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测定分子量的原理 ● 掌握垂直板电泳的操作方法 。学习考马斯亮蓝显色操作技术 了解标准曲线法测定蛋白质分子的方法
1.实验目的 l 学习SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定分子量的原理 l 掌握垂直板电泳的操作方法 l 学习考马斯亮蓝显色操作技术 l 了解标准曲线法测定蛋白质分子的方法
》2.实验原理 ⑩回川震業大学 Sichuan Agricuttu时aUn时w◆rt ·SDS(阴离子去污剂)可 以变性蛋白质，且高密度 地与蛋白质结合，从而降 低或消除各种蛋白质分子 SDS 之间天然的电荷差异。 SDS-蛋白质复合物带有 负电荷，具有均一的电荷 天然蛋白质 变性蛋白质 密度，以及相同的荷质比
l SDS（阴离子去污剂）可 以变性蛋白质，且高密度 地与蛋白质结合，从而降 低或消除各种蛋白质分子 之间天然的电荷差异。 SDS-蛋白质复合物带有 负电荷，具有均一的电荷 密度，以及相同的荷质比。 2.实验原理 天然蛋白质 变性蛋白质
》2.实验原理 ⑩D川袭素大学 在聚丙烯酰胺凝胶系统中加入SDS,能破坏蛋白质分子间的非共 价键，在强还原剂如巯基乙醇共用时，可打开蛋白质分子内的二硫键， SDS以其疏水基和蛋白质的疏水区相结合，形成牢固的带负电荷的蛋 白质-SDS复合物。 蛋白质分子的电泳迁移率则主要取决于它的分子质量，而与所带 电荷和形状无关。该方法主要用于测定蛋白质分子中各亚基的分子量
2.实验原理 在聚丙烯酰胺凝胶系统中加入SDS，能破坏蛋白质分子间的非共 价键，在强还原剂如巯基乙醇共用时，可打开蛋白质分子内的二硫键， SDS以其疏水基和蛋白质的疏水区相结合，形成牢固的带负电荷的蛋 白质-SDS 复合物。 蛋白质分子的电泳迁移率则主要取决于它的分子质量，而与所带 电荷和形状无关。该方法主要用于测定蛋白质分子中各亚基的分子量