体外翻译系统 Bacterial extract UUU UUU UUU Phe PhePhe AAA AAA AAA ccc ccc ccc ProProPro Synthetic mRNA Polypeptide
体外翻译系统
体外翻泽系统 ·按一定的碱基比例来合成RNA。 碱基比为U:G=5:1 三联体8种：UUU,UUG,UGU,GUU,GGG,GGU, GUG,UGG。 UUU:UGG=（5'5'5):(51'1)=25:1 UUU:UUG=5:1 根这售盘醒閡铅篷移比拿哥觀维 ·根据这样的推测 出密码子的组成。茹氨基酸测定结果： 苯丙氨酸(UUU):半胱氨酸(UGU)=5:1 苯丙氨酸（UUU):缬氨酸（GUU)=5:1
• 按一定的碱基比例来合成RNA。 碱基比为U:G＝5:1， 三联体8种：UUU，UUG，UGU，GUU，GGG，GGU， GUG，UGG。 UUU:UGG ＝（5´5´5）:（5´1´1）＝25:1 UUU:UUG＝5:1 • 根据这样的推测，在无细胞系统中以这种比例合成的 mRNA产生的氨基酸的比例也应是相应的，这样可以推测 出密码子的组成。如氨基酸测定结果： 苯丙氨酸（UUU）: 半胱氨酸（UGU）＝ 5:1 苯丙氨酸（UUU）: 缬氨酸 （GUU）＝ 5:1 体外翻译系统
核苷酸结合技术 Aminoacyl- UUU tRNAs Ribosomes 0 Trinucleotide UUU Arg UUU Leu Arg 。 Trinucleotide and all tRNAs Ribosomes stick to filter Complex of ribosome,UUU,and pass through filter Phe-tRNA sticks to filter
核苷酸结合技术
核苷酸结合技术 Radioactive amino acid Trinucleotide Ribosome Filter
核苷酸结合技术
人工合成核苷酸 (作为模板，加入dNTP据合成的多肽链的氨基酸组成，破 译氨基酸的密码)） 5-TACTACTACTAC-3 3-ATGATGATGATG-5 RNAPol +GTP +CTP +UTP A+UTP +ATP +ATP 5-GUAGUAGUAGUA-33 5-UACUACUACUAC-3' 图144重复共聚体RNA的合成途径。（仿Watson,JD.et al《M6 lecular Biology of the Gene)4th Ed.1987,Fig.15.4) 柯腊拉(H.G.Khorana) (1922) 表14-1用二个或三个、四个核苷酸构造重复共聚体来确定密码子 重复顺序 可组成的三联密码 多肽的氨基酸组成 (UC)n UCU-CUC Ser-Leu (UUC)n (UUC);(UCU);(CUU) poly Phe,poly Ser,poly Leu (UUAC)n (UUA-CUU-ACU-UAC) Leu-Leu-Thr-Tyr
人工合成核苷酸 （作为模板，加入dNTP,据合成的多肽链的氨基酸组成，破 译氨基酸的密码） 柯腊拉（H.G.Khorana） （1922～） 表14-1 用二个或三个、四个核苷酸构造重复共聚体来确定密码子 重复顺序 可组成的三联密码 多肽的氨基酸组成 (UC)n UCU-CUC Ser-Leu (UUC)n (UUC); (UCU); (CUU) poly Phe, poly Ser, poly Leu (UUAC)n (UUA-CUU-ACU-UAC) Leu-Leu-Thr-Tyr