2.诱导同步化 。 1)DNA合成阻断法: 用DNA合成抑制剂,可逆阻断细胞周期,然后释放。碱基 类似物如羟基尿,高浓度AdR、GdR和TdR,均可抑制DNA合 成使细胞同步化,常用TdR双阻断法。 -优点:同步化程度高: -缺点:产生非均衡生长,个别细胞体积增大。 2)中期阻断法 用秋水仙素等微管抑制剂将细胞阻断在中期。优点是便于 观察染色体,缺点是可逆性较差。 3)条件依赖突变株应用于细胞周期同步化 D72008
• 2. 诱导同步化 • 1)DNA合成阻断法: 用DNA合成抑制剂,可逆阻断细胞周期,然后释放。碱基 类似物如羟基尿,高浓度AdR、GdR和TdR,均可抑制DNA合 成使细胞同步化,常用TdR双阻断法。 – 优点:同步化程度高; – 缺点:产生非均衡生长,个别细胞体积增大。 • 2)中期阻断法 用秋水仙素等微管抑制剂将细胞阻断在中期。优点是便于 观察染色体,缺点是可逆性较差。 3)条件依赖突变株应用于细胞周期同步化
G2 M G2 G2 进行细胞周期同步化 应用过量的身阻断法 A,处于对数期的细胞;B, 第一次加入TdR,所有处于S 羟基尿同步化大蒜根尖细胞 期的细胞立即被抑制,其他 细胞运行到G1S期交界处被 抑制:C,将TdR洗脱,解除 抑制,被抑制的细胞沿细胞 周期运行:D,在解除柳制 的细胞到达61期性点前,第 二次加入TR并蝶铁培齐 所有的细的被抑制在GS期 文界处 Dr Tian 2008
羟基尿同步化大蒜根尖细胞 应用过量的TdR 阻断法 进行细胞周期同步化 • A,处于对数期的细胞; B , 第一次加入TdR,所有处于 S 期的细胞立即被抑制,其他 细胞运行到G1/S期交界处被 抑制; C,将TdR洗脱,解除 抑制,被抑制的细胞沿细胞 周期运行; D,在解除抑制 的细胞到达G1期终点前,第 二次加入TdR并继续培养, 所有的细胞被抑制在G1/S 期 交界处
五特殊的细胞周期 1) 早期胚胎细胞的细胞周期 分裂迅速,细胞数量增加,体积 变小,总体细胞体积变化不大。 G1期、G2期极短,可以认为仅有S 期和M期。 一间期只复制DNA,细胞不生长。 2)酵母细胞的细胞周期 一芽殖酵母和裂殖酵母的核内有丝 分裂。 细胞周期持续时间短;分裂时核 膜不解聚;纺锤体在核内组装; 蛙早期胚胎细胞分裂 调控过程与标准细胞周期相似; 参与调控细胞周期的基因与高等 生物基本相同
五 特殊的细胞周期 1 )早期胚胎细胞的细胞周期 – 分裂迅速,细胞数量增加,体积 变小,总体细胞体积变化不大。 – G1期、G2期极短,可以认为仅有 S 期和 M期。 – 间期只复制DNA,细胞不生长。 2 )酵母细胞的细胞周期 – 芽殖酵母和裂殖酵母的核内有丝 分裂。 – 细胞周期持续时间短;分裂时核 膜不解聚;纺锤体在核内组装; 调控过程与标准细胞周期相似; 参与调控细胞周期的基因与高等 生物基本相同。 蛙早期胚胎细胞分裂
起始 起始 纺锤体极体 复制,出芽 DNA复制 生长 生长 G DNA复制 极制色 染 胞质分裂 胞质分裂 ● M ● 细胞核分离 G e 纺锤体形成 > 纺锤体延长 纺锤体形成 染色体分离 染色体分离 芽殖酵母与裂殖酵母的细胞周期 D7205
芽殖酵母与裂殖酵母的细胞周期
m e 05m 酵母的起始点、核内纺锤体和纺锤体极体 %2008 29
酵母的起始点、核内纺锤体和纺锤体极体