↓涂乳胶与曝光 +H-TdR 放射自显影 显彩 洗脱 定期取样 ↓定能 观察 100 80 60 0 放射性同位素脉冲标记法测定细胞周期时间 20 5 10152023 30 H-TdR参入后的时间/h Dr Tian 2008
放射性同位素脉冲标记法测定细胞周期时间
60 至 流式细胞仪测定法 40 Go/GI 20 G2- G M 0 200 400 600 细胞周期时相 D含意2-A)】 叹 80 60 流式细胞仪测定细胞周期 40 G2 M 20 1.0 2.0 0 200400 600 DNA含量（相对浓度C) B DA含量(L2-A) 208
流式细胞仪测定细胞周期 流式细胞仪测定法
四细胞同步化 细胞同步化(synchronization)是指在自然过程中发生或经人为 处理造成的一个细胞群体按同一时相进行生长和分裂。 (一)自然同步化 ·1.多核体：粘菌、疟原虫，胚乳核，小孢子母细胞。 2.水生动物受精卵卵裂：海胆、两栖类。 3.增殖抑制解除后的同步分裂：真菌休眠孢子。 果蝇胚细胞分裂 小孢子母细胞分
四 细胞同步化 （一）自然同步化 • 1. 多核体：粘菌、疟原虫，胚乳核，小孢子母细胞。 • 2 . 水生动物受精卵卵裂：海胆、两栖类。 • 3. 增殖抑制解除后的同步分裂：真菌休眠孢子。 果 蝇 胚 细 胞 分 裂 小 孢 子 母 细 胞 分 裂 细胞同步化(synchronization)是指在自然过程中发生或经人为 处理造成的一个细胞群体按同一时相进行生长和分裂
(二)人工同步化 1.选择同步化 1)有丝分裂选择法 一优点：操作简单，同步化程度高，细胞不受药物伤害。 -缺点：获得的细胞数量较少（分裂细胞约占1%2%）。 ·2)细胞沉降分离法（密度梯度离心法 一优点：细胞不受药物伤害。 一缺点：同步化程度较低，酵母适用，大多数细胞不适用。 D72008
（二）人工同步化 • 1. 选择同步化 • 1）有丝分裂选择法 – 优点：操作简单，同步化程度高，细胞不受药物伤害。 – 缺点：获得的细胞数量较少（分裂细胞约占1%～2%）。 • 2）细胞沉降分离法 （密度梯度离心法） – 优点：细胞不受药物伤害。 – 缺点：同步化程度较低，酵母适用，大多数细胞不适用
M期细胞变圆， 黏着力减弱 振荡分离M期细胞 从培养细胞中收集M期细胞的方法 直接用于M期细胞 分析，或继续培养， 获得其他时相的 同步化细胞
从培养细胞中收集Ｍ期细胞的方法