泰山医学院 Taishan Medical University 细胞生物学 生物学与遗传学基本实验技术 主编刘京昇李永芳李效良 副主编赵静郭淼齐冰 编者（以姓氏笔划为序） 刘京昇刘锦华齐冰许风华 李永芳李效良宗传龙赵静 姜红霞郭淼常正尧 1
瓜泰山医学院 细胞生物学 前言 生物学是一门发展迅速的科学，当前，生物科学在理论研究和实验技术研究方面都取得 了重人进展。为适应现代生物科学的发展及教有改革的需要，根据普通生物学、细胞生物学、 医学遗传学课程教学大纲的要求，吸取过去多年生物学与遗传学实验的经验，在原有细胞生 物学与遗传学实验讲义的基础上，进行修订与改编，并补充了一些新的实验内容，形成现在 的实验教材。本教材可作为医学院校、综合院校本科、专科学生及相关专业研究生学习生物 学、细胞生物学、医学遗传学等相近课程的实验用教材 本教材共包括七章。第一章为生物的类群，包括植物、动物的主要类群和常用动物的解 剖和实验室解剖基础知识。第二章为细胞生物学部分，包括显微镜的结构和使用、细胞结构 的观察、细胞组分的分离、细胞分裂、细胞培养、细胞传代和保存、细胞融合等内容。第三 章为染色体制备与分析部分，包括大白鼠骨髓细胞染色体制备、人类外周血淋巴细胞染色体 的制备及核型分析、人类各种显带染色体的制备与分析、姐妹染色体互换技术等。第四章为 分子遗传学相关实验，包括人类基 因组DNA的提取、质粒DNA的提取、DNA的限制性内 切酶酶解片段的电泳分离、感受态大肠杆菌的制备和质粒分化等。第五章包括人类遗传性状 的特点、系谱分析和皮纹特征。第六章为分子细胞遗传学相关实验，介绍荧光原位杂交技术。 第七章为附录部分，附有实验研究中一些常用试剂的配制、生物学与遗传学相关学科数据库 及网址、人类染色体非显带核型和显带核型分析实验报告及照片资料。 本教材所选实验都是在多年实验的基础上经修改后精选出米的。因而实验中的步骤、力 法和时间更符合实际，实验结果明显、稳定。本教材涉及内容较广泛，包括群体水平、细胞 水平、染色体水平和分子水平等不同层次的实验。可供学习生物学、细胞生物学、遗传学等 相关课程的多种专业学生选用。每一实验均写明试剂配制方法、思考题，在教材附录中有常 用试剂和缓冲液配制及染色体分析照片资料等内容，使教材使用起来更方便更适用。 在本教材编写中得到了主管领导的关心和支持，也借鉴了兄弟院校的宝贵经验，一并表 示表心的感谢 因编者水平有限，教材中肯定存在许多缺点和错误，恳请同行专家和使用者不吝赐教。 编者 2007.6
风泰山医学院 细胞生物学 实验守则 进入生物实验室的学生必须认真学习并严格遵守如下实验守则 1.做好课前预习：实验课前，要认真阅读实验指导及与教材的有关内容，明确实验目的、 要求、实验原理和注意事项，了解实验内容、方法和步玀。 2.做好课前准备：每次实验课必须带实验指导、实验报告、铅笔、橡皮、尺子，以备 绘图使用。 3.进入实验室后，要对号入座，实验前要认真检查所用仪器、药品等是否完好、齐全 如有缺损，应及时向老师报告 实验中注意不准乱丢纸屑和污物，保持室内整洁 4,要注重培养良好的社会公德和严谨的科学作风。实验中要以严谨、认真的态度进行 实验操作，仔细观察，做好实验记录，同学之间要相互关心，相互帮助，密切协作，熟练掌 握生物学与遗传学基木操作技能。 5。要亚守实哈室纪律，应提前510分钟讲入实哈常，实验中不准大由暗修、说笑.不 得随意下位走动，不得无故迟到、早退。要保持良好的实验秩疗 6.要及时、认真完成实验报告，每份实验报告须写明年级、专业、班、所在实验室 学号等信息。 7.爱护标本、器材和仪器设备，对贵重精密仪器如显微镜等，应做到细心操作、精心 保管。如有损坏，应及时报告、主动登记，严格遵守损坏赔偿制度。节约实验材料、药品试 剂、水电，杜绝浪费现象。 8。实验结束后，实验用过的器材要清洗干净，应将实验仪器、用品等物放置整齐，突 面收拾干净，待实验总结完毕后方可离开实验室。值日生要认真做好室内清洁卫生。离开时 带走垃圾
泰山医学院 GO Taishan Medical University 细胞生物学 目录 第一章生物的类群 实验一动物界的主要类群 实验二植物的主要类群 实验三实验动物解剖基础知识 实验四家兔的解剖 实验五大白鼠的解剖 第二章细胞生物学相关实验 实验一光学显微镜的构造和使用 实验二细胞的基本形态与结构 实验三细胞器的观察 实验四细胞膜的通透性和细胞的吞噬活动 实验五细胞组分的分离和鉴定 实验六 细胞骨架的显示与观察 实验七 细胞的显微测量 实验八 细胞的有丝分裂 实验九减数分裂 实验十细胞原代培养 实验十一细胞传代培养 实验十二培养细胞的换液 实验十三细胞的保存 实验十四细胞的复苏 实验十五细胞计数 实验十六细胞生长曲线（计数法） 实验十七培养细胞的分裂指数和集落形成率的测定 实验十八培养细胞的形态观察 实验十九细胞融合 第三章染色体制备与分析 实验一大白鼠骨髓细胞染色体的制备及观察 实验二人类外周血淋巴细胞培养及染色体标本制备 实验三人类非显带染色体核型分析 实验四人类染色体G显带技术及G带核型分析 实验五人类性染色质标本的制备与观察 实验六绒毛细胞染色体标本的制备 实验七脆性X染色体标本的制备与观察 实验八羊水细胞培养及染色体制备 实验九人类外周血淋巴细胞姐妹染色单体(SCE)互换技术 实验十人类染色体C带技术 实验十一人类高分辨染色体的制备和观察 第四章分子遗传学相关实验 实验一利用TSL从全血中直接制备人类染色体DNA 实验二外周血基因组DNA的提取 4
泰山医学院 GYO Taishan Medical University 细胞生物学 实验三基因突变分析(PCR-SSCP) 实验四质粒DNA的提取 实验五DNA的限制性酶切和琼脂糖凝胶电泳 实验六DNA片段的回收与纯化 实验七大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 第五章人类遗传性状及系谱分析 实验一人类某些遗传性状的观察 实验二遗传病的系谱分析 实验三人类皮肤纹理分析 第六章分子细胞遗传学相关实验 实验一荧光原位杂交技术 第七章附录 一、培养液和常用试剂配制 二、常用缓冲液配制 三、生物学与遗传学相关学科数据库网址 四、人类染色体非显带和G带核型分析报告 5