Kd=0 Kd=1 0<Kd<1 Kd>1
Kd=0 Kd=1 0<Kd<1 Kd>1
优点: a. 条件温和 b.操作简便 c. 损失少回收率高 d. 层析 柱可反复使用 凝胶的类型: Sephadex: 交联葡聚糖 Sepharose:琼脂糖凝胶 Bio-Gel A Bio-Gel P:聚丙烯酰胺凝胶分子筛 Sephacryl:用N,N-亚甲双丙烯酰胺交联的葡聚糖凝 胶 G-10 G-15 G-25 G-50 G-75 G-100 G-150 G-200 吸水量 (g/g干凝 胶) 1.0 1.5 2.5 5.0 7.5 10.0 15.0 20.0 工作范围 (肽与蛋 白)D <700 <1500 <5000 1500- 20000 3000- 70000 4000- 150000 5000- 300000 5000- 500000
优点: a. 条件温和 b.操作简便 c. 损失少回收率高 d. 层析 柱可反复使用 凝胶的类型: Sephadex: 交联葡聚糖 Sepharose:琼脂糖凝胶 Bio-Gel A Bio-Gel P:聚丙烯酰胺凝胶分子筛 Sephacryl:用N,N-亚甲双丙烯酰胺交联的葡聚糖凝 胶 G-10 G-15 G-25 G-50 G-75 G-100 G-150 G-200 吸水量 (g/g干凝 胶) 1.0 1.5 2.5 5.0 7.5 10.0 15.0 20.0 工作范围 (肽与蛋 白)D <700 <1500 <5000 1500- 20000 3000- 70000 4000- 150000 5000- 300000 5000- 500000
凝胶及柱的选择
凝胶及柱的选择
•凝胶的处理及装柱 凝胶干粉的溶胀(热溶 胀)、浮选、抽气、装 柱、蓝色葡聚糖检查、 平衡 装柱时要注意操作压
•凝胶的处理及装柱 凝胶干粉的溶胀(热溶 胀)、浮选、抽气、装 柱、蓝色葡聚糖检查、 平衡 装柱时要注意操作压
装柱的两种方法: a.手工操作 1/3床体积水→加入少许凝胶积起1-2 厘米凝胶床→打开出水口→连续缓慢 加入凝胶 b.电动搅拌下的装柱法 (如图4-9)
装柱的两种方法: a.手工操作 1/3床体积水→加入少许凝胶积起1-2 厘米凝胶床→打开出水口→连续缓慢 加入凝胶 b.电动搅拌下的装柱法 (如图4-9)