1.3 Michaelis- Menten方程的参数估计 对特定的酶促反应,其动力学的MM方程中 的V和K是该酶促反应的特征参数。对Vn和 K的确定的方法有 Lineweaver-Burk法; Hanes Woolf法; Eadie- Hofstee法;积分法等 (1) Lineweaver -Burk法(简称LB法) 对MM方程(1-11)式取倒数,得到 1K1 (1-12) max max
1.1.3 Michaelis-Menten方程的参数估计 对特定的酶促反应，其动力学的M-M方程中 的Vmax和Km是该酶促反应的特征参数。对Vmax和 Km的确定的方法有Lineweaver-Burk法 ；HanesWoolf法 ；Eadie-Hofstee法 ；积分法 等 （1） Lineweaver-Burk法（简称L-B法） 对M-M方程（1-11）式取倒数，得到 （1-12） S m V C K V V 1 1 1 max max = +
2) Hanes-Woolf法(简称H-W法) 对LB法的(1-12)式的等式两端同乘C 此种方法减少了C值过大或过小所带来的测量误 差 C、K, (1-13) maX (3) Eadie- Hofstee法(简称EH法) 将MM方程重排得到: 1-14) K max
（2） Hanes-Woolf法（简称H-W法） 对L-B法的（1-12）式的等式两端同乘CS ， 此种方法减少了CS值过大或过小所带来的测量误 差。 （1-13） （3）Eadie-Hofstee法（简称E-H法） 将M-M方程重排得到 ： （1-14） max Vmax C V K V CS m S = + S m C V V =Vmax − K
(4)积分法 用不同的酶促反应的时间t与其反应过 程相对应的底物浓度之间的函数关系通过 作图或回归的方法确定酶促反应动力学参 数 SO max K.K. Cso-C SO (1-15)
（4）积分法 用不同的酶促反应的时间t与其反应过 程相对应的底物浓度之间的函数关系通过 作图或回归的方法确定酶促反应动力学参 数。 （1-15） S S m m S S S S C C t K V C C K C C − = − + − 0 max 0 0 1 ln
例:在pH5.1、15℃下所测定的用葡萄糖淀粉酶水解麦芽 糖的反应初速度V如表所示。求这一酶促反应的动力学参 数 V、和K max 表1-1葡萄糖淀粉酶水解麦芽糖的反应初速度与底物浓度 s(mmol/L) 0 (mmol/L min) 5.55 0.163 8.33 0.211 0.241 13.89 0.276 16.66 0.301 22.22 0.339 27.77 0.347
例：在pH5.1、15℃下所测定的用葡萄糖淀粉酶水解麦芽 糖的反应初速度V0如表所示。求这一酶促反应的动力学参 数Vmax和Km 。 表1-1 葡萄糖淀粉酶水解麦芽糖的反应初速度与底物浓度 CS（mmol/L） V0（mmol/ L·min） 5.55 0.163 8.33 0.211 11.11 0.241 13.89 0.276 16.66 0.301 22.22 0.339 27.77 0.347
解:采用 Lineweaver-Burk法,对实验数据回归, 有 =1.981+23.100 1 max =0.505(mmo/L·min) 1.981 Kn=23.100×0.505=11661mmoL)
解：采用Lineweaver-Burk法，对实验数据回归， 有 则 V CS 1 1.981 23.100 1 0 = + 0.505 (mmol/L min) 1.981 1 max V = = = 23.100 0.505 =11.661 (mmol/L) Km