(一) 常量凯氏定氨法 1.原理 样品与浓硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分 解,其中碳和氢被氧化为二氧化碳和水逸出,而样品中 的有机氨转化为氨与硫酸结合成硫酸铵。然后加碱蒸馏, 使氨蒸出。 用H3B03吸收后再以标准HCI溶液滴定。根据标准酸 消耗量可以计算出蛋白质的含量。 也可以用过量的标准H2S04或标准HCI溶液吸收后再 以标准NaOH滴定过量的酸
(一)常量凯氏定氮法 1. 原理 样品与浓硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分 解,其中碳和氢被氧化为二氧化碳和水逸出,而样品中 的有机氮转化为氨与硫酸结合成硫酸铵。然后加碱蒸馏, 使氨蒸出。 用H3BO3吸收后再以标准HCl溶液滴定。根据标准酸 消耗量可以计算出蛋白质的含量。 也可以用过量的标准H2SO4或标准HCl溶液吸收后再 以标准NaOH滴定过量的酸
2.过程:消化、蒸馏、 吸收与嫡定 1).消化 总反应式: 2NH2(CH2)2C00H+13H2S04 (NH4)2S04+6C02+12S02+16H20 一定要用浓疏酸(98%) <1>98%浓疏酸 浓硫酸具有脱水性,使有机物脱水后被炭化为碳、氢、氮。 浓硫酸具有氧化性,将有机物炭化后的碳氧化为二氧化碳, 硫酸则被还原成二氧化硫。 H2S04+C=2S02+2H20+C02 二氧化硫使氮还原为氨,本身则被氧化为三氧化硫,氨随 之与硫酸作用生成硫酸铵留在酸性溶液中。 H,SO+2NH3= NHASO 2
2.过程:消化、蒸馏、吸收与滴定 1). 消化 总反应式: 2NH2(CH2)2COOH+13H2SO4 (NH4)2SO4+6CO2+12SO2+16H2O 一定要用浓硫酸(98%) <1> 98%浓硫酸 浓硫酸具有脱水性,使有机物脱水后被炭化为碳、氢、氮。 浓硫酸具有氧化性,将有机物炭化后的碳氧化为二氧化碳, 硫酸则被还原成二氧化硫。 H2SO4 +C =2SO2+ 2H2O +CO2 二氧化硫使氮还原为氨,本身则被氧化为三氧化硫,氨随 之与硫酸作用生成硫酸铵留在酸性溶液中。 H2SO4+2NH3 = (NH4 )2SO4
<2>加硫酸钾作为增温剂,提高溶液沸点, 纯硫酸沸点340℃,加入硫酸钾之后可以提高 至400℃以上。也可加入硫酸钠,氯化钾等提 高沸点,但效果不如硫酸钾 <3>加硫酸铜作为催化剂。还可以作消化终,点指示剂 (做蒸馏时碱性指示剂)。还可以加氧化汞、汞(均有 毒,价格贵)、硒粉、二氧化钛。 <4>加氧化剂如双氧水、次氯酸钾等加速有机物氧化速 度
<3> 加硫酸铜 作为催化剂。还可以作消化终点指示剂 (做蒸馏时碱性指示剂)。还可以加氧化汞、汞(均有 毒,价格贵)、硒粉、二氧化钛。 <4> 加氧化剂 如双氧水、次氯酸钾等加速有机 物氧化速 度。 <2>加硫酸钾 作为增温剂,提高溶液沸点, 纯硫酸沸点 340℃,加入硫酸钾之后可以提高 至400℃以上。也可加入硫酸钠,氯化钾等提 高沸点,但效果不如硫酸钾
仪器: 铁支架 消化装置 石棉网 凯氏烧瓶 .电炉 a.消化装置
仪器: 消化装置
KDN-08 消化炉 上海洪纪仪器设备有限公司 898g <HL