第四章 基因在大肠杆菌、酵 母中的高效的表达 第一节基因的表达系统与表达策略 第二节基因在大肠杆菌中的高效表达 第三节基因在酵母中的表达
第四章 基因在大肠杆菌、酵 母中的高效的表达 第一节 基因的表达系统与表达策略 第二节 基因在大肠杆菌中的高效表达 第三节 基因在酵母中的表达
前言 ●基因表达是指结构基因在生物体中的转录、 翻译以 及所有加工过程。 ●基因工程主要目标之一是生产常规方法难以生产的 大量蛋白质产物一即实现基因的高效表达。 ●基因高效表达研究是指外源基因在某种细胞中的表 达活动，即剪切下外源基因片段，拼接到另一个基因 表达体系中，使其能获得原生物活性又可高产的表达 产物
前言 ⚫基因表达是指结构基因在生物体中的转录、翻译以 及所有加工过程。 ⚫基因工程主要目标之一是生产常规方法难以生产的 大量蛋白质产物—即实现基因的高效表达。 ⚫基因高效表达研究是指外源基因在某种细胞中的表 达活动，即剪切下外源基因片段，拼接到另一个基因 表达体系中，使其能获得原生物活性又可高产的表达 产物
第一节基因的表达系统与表达策略 ●最佳的基因表达体系： ()目的基因的表达产量高； (2)表达产物稳定； (3)生物活性高； (4)表达产物容易分离纯化
⚫最佳的基因表达体系： ⑴目的基因的表达产量高; ⑵表达产物稳定; ⑶生物活性高; ⑷表达产物容易分离纯化。 第一节基因的表达系统与表达策略
宿主细胞的选择 一、适合目的基因表达的宿主细胞的要求： 1、容易获得较高浓度的细胞； 2、能利用易得廉价原料： 3、不致病、不产生内毒素： 4、发热量低、需氧低、适当的发酵温度和细胞形态： 5、容易进行代谢调控： 6、容易进行DNA重组技术操作； 7、产物的产量、产率高， 8、产物容易提取纯化
宿主细胞的选择 一、适合目的基因表达的宿主细胞的要求: 1、容易获得较高浓度的细胞； 2、能利用易得廉价原料； 3、不致病、不产生内毒素； 4、发热量低、需氧低、适当的发酵温度和细胞形态； 5、容易进行代谢调控； 6、容易进行DNA重组技术操作； 7、产物的产量、产率高， 8、产物容易提取纯化
二、宿主细胞分为两大类 1、原核细胞：常用有大肠杆菌、枯草芽胞杆菌、 链霉菌等； 2、真核细胞：常用有酵母、丝状真菌、哺乳动物 细胞等
二、宿主细胞分为两大类： 1、原核细胞：常用有大肠杆菌、枯草芽胞杆菌、 链霉菌等； 2、真核细胞：常用有酵母、丝状真菌、哺乳动物 细胞等