1.细胞全能性(totipotency) • 细胞全能性是组织培养的理论基础,细胞 全能性是指植物每个有核细胞都具备母体 的全套基因,在适宜的条件下,每个核细 胞都可以形成一个完整的植株
1.细胞全能性(totipotency) • 细胞全能性是组织培养的理论基础,细胞 全能性是指植物每个有核细胞都具备母体 的全套基因,在适宜的条件下,每个核细 胞都可以形成一个完整的植株
2. 再分裂和脱分化 • 细胞具有再分裂和脱分化 (dedifferentiation)能力,是组织培 养的第二个理论基础。在适宜的条件下, 外植体植物已经停止分裂的细胞,重新 进行分裂,经过多次分裂后,细胞失去 原有的分化状态,称为脱分化
2. 再分裂和脱分化 • 细胞具有再分裂和脱分化 (dedifferentiation)能力,是组织培 养的第二个理论基础。在适宜的条件下, 外植体植物已经停止分裂的细胞,重新 进行分裂,经过多次分裂后,细胞失去 原有的分化状态,称为脱分化
3. 再分化 • 已经脱分化(redifferentiation)的细胞 具有再分化的能力,外植体细胞分裂的结 果,是形成愈伤组织。 • 愈伤组织是指在组织培养中产生的,由薄 壁细胞构成的无组织结构的细胞团。 • 愈伤组织细胞可进行分化,形成胚状体 (embryoid)或直接分化出根和芽等器官, 从而形成一个完整的小植株(plantlet)
3. 再分化 • 已经脱分化(redifferentiation)的细胞 具有再分化的能力,外植体细胞分裂的结 果,是形成愈伤组织。 • 愈伤组织是指在组织培养中产生的,由薄 壁细胞构成的无组织结构的细胞团。 • 愈伤组织细胞可进行分化,形成胚状体 (embryoid)或直接分化出根和芽等器官, 从而形成一个完整的小植株(plantlet)
二、组织培养的程序 1. 配制培养基 • 根据培养的对象和目的,配制培养基,培养基一般包括 五大类物质: (1)无机营养:包括大量元素和微量元素; (2)碳源:1~4%的蔗糖,提供碳素营养和维持参透压; (3)维生素:主要是维生素B1、B2、烟酸和肌醇等; (4)生长物质:生长素类(2,4—D,NAA),细胞 分裂素类(6—BA,KT); (5)有机附加物,如甘氨酸、水解蛋白、酵母汁等。 • 配制好的培养基要经过高压灭菌,才能使用
二、组织培养的程序 1. 配制培养基 • 根据培养的对象和目的,配制培养基,培养基一般包括 五大类物质: (1)无机营养:包括大量元素和微量元素; (2)碳源:1~4%的蔗糖,提供碳素营养和维持参透压; (3)维生素:主要是维生素B1、B2、烟酸和肌醇等; (4)生长物质:生长素类(2,4—D,NAA),细胞 分裂素类(6—BA,KT); (5)有机附加物,如甘氨酸、水解蛋白、酵母汁等。 • 配制好的培养基要经过高压灭菌,才能使用
2. 选取植物材料 • 从理论上讲,每个有核细胞都可培养成一个植株, 但在实际操作中,不同来源的细胞,培养的难易 程度差异很大,幼嫩的组织,如根尖、薄壁组织、 花药绒毡层细胞很容易培养。 • 不同植物组织培养的难易程度也不同,“有心栽 花花不活,无心插柳柳成荫”。不同植物容易培 养的也不相同,如兰科植物用茎尖,茄科植物和 到海棠用叶,冬青用子叶
2. 选取植物材料 • 从理论上讲,每个有核细胞都可培养成一个植株, 但在实际操作中,不同来源的细胞,培养的难易 程度差异很大,幼嫩的组织,如根尖、薄壁组织、 花药绒毡层细胞很容易培养。 • 不同植物组织培养的难易程度也不同,“有心栽 花花不活,无心插柳柳成荫”。不同植物容易培 养的也不相同,如兰科植物用茎尖,茄科植物和 到海棠用叶,冬青用子叶