第三章 细胞生物学实验技术 METHODS AND TECHNIQUES
第三章 细胞生物学实验技术 METHODS AND TECHNIQUES
第三节 细胞分离技术
第三节 细胞分离技术
一、离心技术 ➢ 是分离细胞器（如细胞核、线粒体、高尔基体）及各 种大分子基本手段。 ➢ 转速为10~25kr/min的离心机称为高速离心机。 ➢ 转速>25kr/min，离心力>89Kｇ者称为超速离心机。 ➢ 目前超速离心机的最高转速可达100000r/min，离心 力超过500Kg
一、离心技术 ➢ 是分离细胞器（如细胞核、线粒体、高尔基体）及各 种大分子基本手段。 ➢ 转速为10~25kr/min的离心机称为高速离心机。 ➢ 转速>25kr/min，离心力>89Kｇ者称为超速离心机。 ➢ 目前超速离心机的最高转速可达100000r/min，离心 力超过500Kg
（一）差速离心 Differential centrifugation ➢ 特点： ⚫ 介质密度均一； ⚫ 速度由低向高，逐级离心。 ➢ 用途：分离大小相差悬殊的细胞和细胞器。 ➢ 沉降顺序：核——线粒体——溶酶体与过氧化物酶体—— 内质网与高基体——核蛋白体。 ➢ 可将细胞器初步分离，常需进一步通过密度梯离心再行分 离纯化
（一）差速离心 Differential centrifugation ➢ 特点： ⚫ 介质密度均一； ⚫ 速度由低向高，逐级离心。 ➢ 用途：分离大小相差悬殊的细胞和细胞器。 ➢ 沉降顺序：核——线粒体——溶酶体与过氧化物酶体—— 内质网与高基体——核蛋白体。 ➢ 可将细胞器初步分离，常需进一步通过密度梯离心再行分 离纯化
Low speed High speed Differential centrifugation
Low speed High speed Differential centrifugation