实验二、纟细胞荧光染色观察与荧光显微镜的使用
实验二、细胞荧光染色观察与 荧光显微镜的使用
一、荧光显微镜的成像原理荧光显微镜是一种较为常用的的光学显微镜，它是由光源、滤色镜系统和光学系统等主要部件组成。其基本原理是利用一定波长的激发光对样品进行激发，使之产生一定波长的荧光，从而用于对样品结构或其组分进行定性、定位、定量观察检测
一、荧光显微镜的成像原理 荧光显微镜是一种较为常用的的光学显微镜，它 是由光源、滤色镜系统和光学系统等主要部件组成。 其基本原理是利用一定波长的激发光对样品进行 激发，使之产生一定波长的荧光，从而用于对样品 结构或其组分进行定性、定位、定量观察检测
1、什么是荧光？HigerEnergyandVibration State某些物质经波长较短的光Lowest SingletExcitedStateSsSSSSSSSS照射后，分子被激活，吸收能Lossof Energyo量后呈激发态。其能量部分转化为热能或用于光化学反应外，相当一部GroundState分则以波长较长的光能形式辐Fluorescence射出来，这种波长长于激发光Withinfemtoseconds afler lightexcites thefluorophoreatanappropriate wavelength,its electrons jump trom theground statetoahigher vibrational state.Within picosecondsthese electrons decay to the lowest excited state,and then decay more slowly (nsec)issionofaphotonwhose.wavelengthislongerbacktothegroundstatewiththeen的可见光称为荧光。thantheexcitingwavelength,Clicktocontinue>>
1、什么是荧光 ? 某些物质经波长较短的光 照射后，分子被激活,吸收能 量后呈激发态。 其能量部分转化为热能或 用于光化学反应外，相当一部 分则以波长较长的光能形式辐 射出来，这种波长长于激发光 的可见光称为荧光
2、荧光的性质保持固有的荧光特性荧光波长>激发波长荧光强度小于激发光的强度一有不同程度的衰减荧光强度取决于激发光强度、被检物浓度
保持固有的荧光特性 荧光波长＞激发波长 荧光强度小于激发光的强度 有不同程度的衰减 荧光强度取决于激发光强度、被检物浓度 2、荧光的性质
荧光的种类3、自发荧光次生荧光StainedAutofluorescenceRadiationStimulusEmitted LightNot stained一种是标本自身的原有荧光（自发荧光），另一种是利用荧光色素和细胞的特定部分反应所产生的荧光（次生荧光）
自发荧光 次生荧光 3、荧光的种类 一种是标本自身的原有荧光（自发荧光），另一种是利用荧光色 素和细胞的特定部分反应所产生的荧光（次生荧光）