《细胞与显微技术实验》实验九动物骨髓细胞染色体的制备
实验九 动物骨髓细胞 染色体的制备 《细胞与显微技术实验》
一、实验目的和要求心了解制备中期染色体标本的原理?掌握动物骨髓细胞染色体标本的制备技术?观察染色体的数自以及形态特征
了解制备中期染色体标本的原理 掌握动物骨髓细胞染色体标本的制备技术 观察染色体的数目以及形态特征 一、实验目的和要求
二、实验原理在正常动物细胞中，骨髓是处于不断分裂的组织之一，骨髓细胞中的造血干细胞是生成各种血细胞和原始细胞，具有高度的分裂活性并且数量非常多。处于分裂期的细胞经秋水仙素或秋水酰胺处理后，由于阻断了纺锤丝微管的组装，使分裂细胞阻断在有丝分裂中期，此时染色体达到最大收缩，具有典型的形态，再经离心、低渗处理及固定、滴片、染色等步骤，便可制作较好的骨髓细胞的染色体标本
在正常动物细胞中，骨髓是处于不断分裂的组织之一，骨髓 细胞中的造血干细胞是生成各种血细胞和原始细胞，具有高度 的分裂活性并且数量非常多。处于分裂期的细胞经秋水仙素或 秋水酰胺处理后，由于阻断了纺锤丝微管的组装，使分裂细胞 阻断在有丝分裂中期，此时染色体达到最大收缩，具有典型的 形态，再经离心、低渗处理及固定、滴片、染色等步骤，便可 制作较好的骨髓细胞的染色体标本。 二、实验原理
三、实验用品1.材料牛蛙。2.器具：解剖器具、注射器(2mL）、离心机、刻度离心管、玻璃吸管、载玻片、盖玻片、显微镜、恒温水浴锅等。3. 试剂：2mg/ml秋水仙素溶液、固定液（甲醇：冰醋酸一31)、0.075mol/L的KCI低渗溶液、Giemsa染液、磷酸缓冲液（pH7.2)、0.85%生理盐水等
三、实验用品 1. 材料 牛蛙。 2. 器具: 解剖器具、注射器(2 mL) 、离心机、刻度离心管、 玻璃吸管、载玻片、盖玻片、显微镜、恒温水浴锅 等。 3. 试剂: 2 mg/ml 秋水仙素溶液、固定液 (甲醇：冰醋酸＝3： 1)、0.075 mol/L的KCl低渗溶液、Giemsa染液、磷 酸缓冲液(pH 7.2)、0.85%生理盐水等
四、实验步骤1、秋水仙素处理：实验前一天晚上，按照青蛙每克体重4ug的剂量腹腔注射秋水仙素2、取股骨：将牛蛙处死，迅速取出股骨（为了获得较多的骨髓细胞胫骨亦可使用），用剪刀和纱布剥去全部肌肉组织，用骨剪剪开长骨两端的膨大部半透明软骨（不能全部剪断），程度以刚刚露出红色的骨髓组织为宜。收集前后肢提取6根骨头（每组3根）
1、秋水仙素处理：实验前一天晚上，按照青蛙每克体重4 ug的剂量， 腹腔注射秋水仙素。 2、取股骨：将牛蛙处死，迅速取出股骨（为了获得较多的骨髓细胞胫骨 亦可使用），用剪刀和纱布剥去全部肌肉组织，用骨剪剪开长骨两端 的膨大部半透明软骨（不能全部剪断），程度以刚刚露出红色的骨髓 组织为宜。收集前后肢提取6根骨头（每组3根）。 四、实验步骤