普通生物学实验GFP报告基因的显微观察及其在生物学研究中的应用
普通生物学实验 GFP报告基因的显微观察及其在 生物学研究中的应用
报告基因一reportergene编码可被检测的蛋白质或酶的基因,其表达产物容易被鉴定;将它的编码序列和目的基因的表达调控序列或目的基因相融合,转化到生物体中;通过检测其表达可以研究在生物体内,调控序列的作用方式或目的基因的表达调控
报告基因-reporter gene 编码可被检测的蛋白质或酶的基因,其表达产物容易被鉴定; 将它的编码序列和目的基因的表达调控序列或目的基因相 融合,转化到生物体中; 通过检测其表达可以研究在生物体内,调控序列的作用方 式或目的基因的表达调控
报告基因的特点已被克隆和全序列已测定:表达产物在受体细胞中不存在,民即无背景,在被转染的细胞中无相似的内源性表达产物;其表达产物容易观察或能进行定量测定
报告基因的特点 已被克隆和全序列已测定; 表达产物在受体细胞中不存在,即无背景,在被转染的细 胞中无相似的内源性表达产物; 其表达产物容易观察或能进行定量测定
常用的报告基因基因名称检测方法基因编码蛋白催化底物形成β-D-葡萄糖苷β-D-glucuronidase(β-DGUS酸,它在植物体中几平无背葡萄糖苷酶)景,组织化学检测很稳定在有ATP、Mg2+、O,和荧光素(luciferin)存在下发出荧荧光素酶Luciferase光(化学发光,chemiluminescent)GFP绿色荧光蛋白蓝色激发光下发出绿色荧光
常用的报告基因 基因名称 基因编码蛋白 检测方法 GUS β-D-glucuronidase(β-D- 葡萄糖苷酶) 催化底物形成β-D-葡萄糖苷 酸,它在植物体中几乎无背 景,组织化学检测很稳定 Luciferase 荧光素酶 在有ATP、Mg2+、O2和荧光 素 (luciferin)存在下发出荧 光 (化学发光, chemiluminescent) GFP 绿色荧光蛋白 蓝色激发光下发出绿色荧光
1:GUS报告基广泛用于植物、细菌和动物的基因表达研究β-D-glucuronidase(β-D-葡萄糖苷酶)催化底物5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄糖苷酸(X-Gluc)形成蓝色产物gRAX1::GFP:GUSgLAS::GFP:GUSgCLV3:GFP:GUSgMYB2::GFP:GUSgWUS::GFP:GUS检测方法:CdE组织化学法(最常用)分光光度法(最灵敏)荧光法h1植物茎尖生长点WUS、CLV3、RAX1、LAS、MYB2等基因的表达
1: GUS 报告基因 广泛用于植物、细菌和动物的基因表达研究 β-D-glucuronidase(β-D-葡萄糖苷酶)催化底物5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄 糖苷酸(X-Gluc) 形成蓝色产物。 检测方法: 组织化学法(最常用)、 分光光度法(最灵敏)、 荧光法 植物茎尖生长点WUS、CLV3、RAX1、LAS、MYB2 等基因的表达