(3) The most probable number method(液体稀释法) 各接种1m试样 10 培养后统计 10 出现生长的管数 倍系列 10 查对MPN表, 培养后统计 稀释 即知每毫升 出现生长的管数 样品中含菌数 10 2 培养后统计 出现生长的管数 Figure 6.18 The most probable number(MPN) method. In this example, there are three sets of tubes and five tubes in each set. Each tube in the first set of five tubes receives 10 ml of the inoculum, such as a sample of water. Each tube in the second set of five tubes receives 对未知样品进行十倍稀释,然后根据估算取三个连续的稀释度 平行接种多支试管,对这些平行试管的微生物生长情况进行统 计,长菌的为阳性,未长菌的为阴性,然后根据数学统计计算 出样品中的微生物数目
(3) The most probable number method（液体稀释法） 主要适用于只能进行液体培养的微生 物，或采用液体鉴别培养基进行直接 鉴定并计数的微生物。 对未知样品进行十倍稀释，然后根据估算取三个连续的稀释度 平行接种多支试管，对这些平行试管的微生物生长情况进行统 计，长菌的为阳性，未长菌的为阴性，然后根据数学统计计算 出样品中的微生物数目
采用细菌计数板或血球计数板,在显微镜下对微生物数量进行直接 计数(计算一定容积里样品中微生物的数量)。 (4)显微镜直接计数法 1)常规方法 Figure 6.19 Direct Grid with 25 large squares microscopic count of bacteria with a Petroff-Hausser cell Cover glass 血球计数板(大方格中有25个中方格, 每毫升样品中含菌量: 每个中方格中有16个小方格) 12X25X10X10°=300 每平方毫米 包息计数小室 样品加此处 盖玻片与板间距0.1mm 中方格中有12个细胞 每立方毫米 每个大方格面积1m2 每毫升 over the squares can De calcuated (depuis ar IF,VUV,VVV/ VVIIU M,w
(4)显微镜直接计数法 1）常规方法： 采用细菌计数板或血球计数板，在显微镜下对微生物数量进行直接 计数（计算一定容积里样品中微生物的数量）。 缺点： 不能区分死菌与活菌； 不适于对运动细菌的计数； 需要相对高的细菌浓度； 个体小的细菌在显微镜下难以观察；
2)其它方法 比例计数: 将已知颗粒浓度的样品(例如血液)与待测细胞细胞浓度的样品混匀 后在显微镜下根据二者之间的比例直接推算待测微生物细胞浓度。 过滤计数: 当样品中菌数很低时,可以将一定体积的湖水、海水或饮用水等样品 通过膜过滤器。然后将滤膜干燥、染色,并经处理使膜透明,再在显 微镜下计算膜上(或一定面积中)的细菌数 活菌计数: 采用特定的染色技术也可分别对活菌和死菌进行分别计数
2）其它方法： 将已知颗粒浓度的样品（例如血液）与待测细胞细胞浓度的样品混匀 后在显微镜下根据二者之间的比例直接推算待测微生物细胞浓度。 比例计数： 过滤计数： 当样品中菌数很低时，可以将一定体积的湖水、海水或饮用水等样品 通过膜过滤器。然后将滤膜干燥、染色，并经处理使膜透明，再在显 微镜下计算膜上(或一定面积中)的细菌数； 活菌计数： 采用特定的染色技术也可分别对活菌和死菌进行分别计数
5122以生物量为指标测定微生物的生长 (1)比浊法 在一定波长下,测定菌悬液的光密 度,以光密度( optical density,即oD) 表示菌量。 one method of checking for gre in cloudiness (turbidity). The broth on the left is transparent, indicating little or no growth: the broth LITTIU on the right is cloudy and opaque, indicating heavy rowth.() Since the eye is not sensitive enough ck up fine degrees in turbidity, more sensitive A Singh So measurements can be made with ppas And Eouipment spectrophotometer (7) A tube with no growth transmits more lght and gives a higher reading 实验测量时应控制在菌浓度与光密度 成正比的线性范围内,否则不准确
5.1.2.2 以生物量为指标测定微生物的生长 (1)比浊法 在一定波长下，测定菌悬液的光密 度，以光密度(optical density, 即OD) 表示菌量。 实验测量时应控制在菌浓度与光密度 成正比的线性范围内，否则不准确
比浊法 原理是在一定范围内,菌悬液中的细胞浓度与混浊度成 正比,即与光密度成正比,菌数越多,光密度越大。因 此,借助于分光光度计,在一定浪长下测定菌悬液的光 密度,就可反应出菌液的浓度。 特点:快速、简便;但易受干扰。 图7-1测定生长用的侧臂三角瓶(左)和比色管架(右,自制,适用于“721”型分光光度计 侧臂试管三角烧瓶;2.侧臂试管;3.侧臂试管插座;4.比色架面板;5,连接螺丝
比浊法 原理是在一定范围内，菌悬液中的细胞浓度与混浊度成 正比，即与光密度成正比，菌数越多，光密度越大。因 此，借助于分光光度计，在一定波长下测定菌悬液的光 密度，就可反应出菌液的浓度。 特点：快速、简便；但易受干扰