512微生物生长的测定方法 微生物生长: 单位时间里微生物数量或生物量( Biomass)的变化 个体计数 微生物生长的测定:群体重量测定 群体生理指标测定 评价培养条件、营养物质等对微生物生长的影响 评价不同的抗菌物质对微生物产生抑制或杀死)作用的效果; 客观地反映微生物生长的规律;
单位时间里微生物数量或生物量(Biomass)的变化 微生物生长: 微生物生长的测定: 个体计数 群体重量测定 群体生理指标测定 评价培养条件、营养物质等对微生物生长的影响; 评价不同的抗菌物质对微生物产生抑制(或杀死)作用的效果; 客观地反映微生物生长的规律; 5.1.2 微生物生长的测定方法
5.1.2.1以数量变化对微生物生长情况进行测定 通常用来测定细菌、酵母菌等单细胞微生物的生长情况 或样品中所含微生物个体的数量(细菌、孢子、酵母菌) (1)、培养平板计数法 1 1 ml 1 ml 1 ml Original noculu 9m培养液 Dilutions 燃彩珍 待测样品 1/10 1/100 1/10 1/10 1/10 1/10 1/10 每个平皿 加1m稀释液 Plating ○○○ 1:10 菌落太多,无法计数 17 0 Calculat 159×10 159×10 (For example, if 菌落数X稀释倍数=菌体个数/每毫升原样
5.1.2.1 以数量变化对微生物生长情况进行测定 通常用来测定细菌、酵母菌等单细胞微生物的生长情况 或样品中所含微生物个体的数量(细菌、孢子、酵母菌) (1)、培养平板计数法
(a) The pour plate method (b)The sp 采用培养平板计数法要求操作熟练 吉果 Inoculate empty plate Figure 6.5 Equi plate uniform from the side, and the pla d to each col to record the count. (b) An automa In any part the image are counted by the instrument. The counter may be connected to a separate computer
采用培养平板计数法要求操作熟练 、准确,否则难以得到正确的结果: 样品充分混匀; 每支移液管及涂布棒只能接触一个 稀释度的菌液; 同一稀释度三个以上重复,取平均值; 每个平板上的菌落数目合适,便于 准确计数; 一个菌落可能是多个细胞一起形成,所以在科研中一般用 菌落形成单位(colony forming units, CFU)来表示,而 不是直接表示为细胞数
(2)膜过滤培养法 Figure 6.17 Counting bacteria by filtration. (a)The bacteria in 100 ml of water were sieved out onto the surface of a membrane filter. (b) Such a filter, with the bacteria much more widely spaced, was placed on a pad saturated with quid nutrient medium, and the ndividual bacteria grew into visible colonies. One hundred twenty four colonies are visible, so we would record 124 bacteria per 100 ml of water sample Bacteria can be counted by filtra non when their quantity is very mall (a) sEM 微生物在过滤膜表面情况 当样品中茵数很低时,可以将一定体积的湖水、海水或饮用水等样 品通过膜过滤器,然后将将膜转到相应的培养基上进行培养,对形 成的茵落进行统计
(2)膜过滤培养法 当样品中菌数很低时,可以将一定体积的湖水、海水或饮用水等样 品通过膜过滤器,然后将将膜转到相应的培养基上进行培养,对形 成的菌落进行统计。 微生物在过滤膜表面情况
Figure 6.8 Colonies on Membrane Filters. Membrane-filtered samples grown on a variety of media. (a) Standard nutrient media for a total pacterial count. An indicator colors colonies red for easy counting. (b) Fecal coliform medium for detecting fecal coliforms that form blue coloni c)m-Endo agar for detecting E. coli and other coliforms that produce colonies with a green sheen. (d) Wort agar for the culture of yeasts and mo Membrane filter removed an placed in plate Water sample filtered containing the Membrane filter through membrane appropriate Incubation on a filter suppo filter(0. 45 um) medium for 24 hours )alter Figure 6.7 The Membrane Filtration Procedure