核酸操作技术2.质粒DNA的提取溶菌酶或SDS促使大肠杆菌细胞裂解氯化密度梯度离心碱变性法
一 核酸操作技术 2.质粒DNA的提取 溶菌酶或SDS促使大肠杆菌细胞裂解 u氯化铯密度梯度离心 u碱变性法
核酸操作技术2.质粒DNA的提取溶菌酶或SDS促使大肠杆菌细胞裂解氯化艳密度梯度离心(b)(a)碱变性法蛋白质1.601.65CsCI1.70DNA奔馨1.751.80试验方菜caopttocol.comWacme
一 核酸操作技术 2.质粒DNA的提取 溶菌酶或SDS促使大肠杆菌细胞裂解 u氯化铯密度梯度离心 u碱变性法
核酸操作技术2.质粒DNA的提取碱变性法：环状DNA与线性DNA拓扑学上的差异*pH12.0～12.5，DNA变性；制冷条件下，复性（加入pH4.8的KAc高盐缓冲液）；复性快慢不同离心去除蛋白质、DNA和RNA·酒精沉淀洗涤
一 核酸操作技术 2.质粒DNA的提取 u碱变性法 v 环状DNA与线性DNA拓扑学上的差异 v pH12.0～12.5，DNA变性；制冷条件下，复性（加入pH4.8的 KAc高盐缓冲液）； v 复性快慢不同 v 离心去除蛋白质、DNA和RNA v 酒精沉淀 v 洗涤
核酸操作技术2.质粒DNA的提取pUC质粒pBV220质粒HindilEcoRIBamHISalPstlHind HAAGGAG gaattcc cggggatccgtcgac ctgcag cc aagcttPstiXbalSphlSDMCSSallHincllAcciSmalXmalrrnBBamHI-PR PLBanllKpnlSstiEcoRIlacz-AmpicillinpBV220generesistancegene3666bpPolylinker region2686bpClts857pUC18Ampr(Klug &Cummings1997)ori
一 核酸操作技术 2.质粒DNA的提取 upUC质粒 pBV220质粒 2686bp
核酸操作技术2.质粒DNA的提取大肠杆菌E.coli扫描电镜放大22,810倍UI
一 核酸操作技术 2.质粒DNA的提取 u大肠杆菌 E.coli u扫描电镜放大22,810倍